Box-Behnken效应面法优化侧柏叶总黄酮提取工艺.pdfVIP

第 38卷第 1期 云南 中医学院学报 Vo1．38 No．1 2015年 2月 JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine 2．2015 Box—Behnken效应面法优化侧柏叶总黄酮提取工艺 丘思兰 ．一，谭志灿 3A，黄洁靖 3，利创华2,3 (1．广州医科大学附属第五医院，广东 广州510700；2．广州中医药大学，广东广州510405； 3．广州市医药职业学校，广东广州510430) 摘要：目的 优选侧柏叶总黄酮的提取工艺条件。方法 以总黄酮提取率为指标，通过Box—Behnken效应面 法考察乙醇浓度、溶剂体积、提取时间对提取丁艺的影响。结果 最佳提取工艺为加 l5．70倍量 75．44％乙醇，提取2 次，每次 86．46rain。侧柏叶总黄酮提取率 1．6728％．结论 优选的提取工艺稳定可行，数学模型的预测值与试验观 察值相符。 关键词：侧柏叶；总黄酮 ；提取工艺；Box—Behnken效应面法 中图分类号：R284．2 文献标志码：A 文章编号：1000—2723(2015)01—0031—03 侧柏叶，别名柏叶、扁柏叶、丛柏叶，为柏科植 均为分析纯 。 物侧柏 Platycladusorientalis(L．)Franco的干燥枝梢 2 方法与结果 和叶。一般在夏 、秋二季采收，阴干，我国大部分地 2．1 侧柏叶总黄酮的含量测定 区均有产。侧柏叶味苦、涩，性寒。归肺、肝、脾经。具 2．1．1 对照品溶液的制备 有凉血止血，化痰止咳，生发乌发的作用 。用于吐 精密称取槲皮苷对照品 12．05rag，置 25mL量瓶 血，衄血，咯血，便血，崩漏下血，肺热咳嗽 ，血热脱 中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。含槲皮 发，须发早 白等症 ”【。 苷 0．482mg／mL。 侧柏叶主要含有黄酮类化合物 、挥发油、鞣质 2．1．2 供试品溶液的制备 等成分 。现代药理研究表明，侧柏叶具有抑菌、止 精密称取侧柏叶药材粉末 1g，置 50mL圆底烧 血、抗肿瘤、抗炎、抗红细胞氧化等作用5[-9]。侧柏叶 瓶中，加石油醚25mL，回流脱脂两次，每次2h，取药 的主要药效成分为黄酮类化合物。本实验采用Box— 渣干燥，并按照表 1试验设计制备供试品溶液。 Behnken效应面法对侧柏叶总黄酮的提取工艺进行 2．1．3 标准 曲线的绘制 研究，为充分发挥其药用价值提供实验依据。 精 密 吸 取 上 述 槲 皮 苷 对 照 品 溶 液 1 仪器与材料 0．5，1．0，1．5，2．0，2．5，3．0mL，分别置 25mL量瓶 中， SP一756PC型紫外一可见分光光度计(上海光谱 加 乙醇至 6mL，加 5％亚硝酸钠溶液 lmL，摇匀 ，放 仪器有限公司)；HH一8型数显恒温水浴锅 (金坛市 置 6rain，加 10％硝酸铝溶液 lmL，摇匀，放置 6rain， 成辉仪器厂)；ALl04型电子分析天平(上海梅特勒 加4％氢氧化钠溶液 10mL，再加水至刻度，摇匀，放 托利多仪器有限公司)。 置 15min，以相应试剂为空 白对照，照紫外一可见分 侧柏叶药材购 自广东和翔制药有限公司(批号 光光度法 (《中国药典}2010年版一部附录VA)，在 ，经鉴定为柏科植物侧柏 Platycladus 最大吸收波长 500nm处测定其吸光度A，以吸收度 orientalis(L．)Franco的干燥枝梢和叶；槲皮苷对照 A为纵坐标，浓度 C为