二甲双胍对AMPK、PPARy的影响与胰岛素抵抗的研究.pdfVIP

对象进行培养和诱导分化。参考AnilKumarKL分化前脂肪细胞的方法，对细胞 进行分化：将3T3．LI前脂肪细胞置于含15％小牛血清的DMEM高糖培养基中， mmol／L 37℃，5％C02饱和湿度下培养。细胞状态良好时接种于培养皿，加入含0．5 的DMEM高糖培养基培养48 h， h，之后换以含lug／mL胰岛素的培养基再培养48 随后以15％小牛血清的DMEM高糖培养基继续培养，2d换培养液1次，诱导分化 8～12 d的3T3．L1细胞，80％～-90％以上呈脂肪细胞表型可用于试验。运用油红O 染色证明前脂肪细胞诱导成为成熟脂肪细胞：移去诱导分化结束细胞的培养基， 脱色，然后用苏木精复染细胞核，倒置显微下观察、照相。3T3．LIJ]旨肪细胞胰岛 素抵抗细胞模型的建立及药物处理。对分化好的细胞分组进行处理：JJIllumol／L 地塞米松诱导胰岛素抵抗，每2d换1次液，取上清液，以培养基中的葡萄糖的消 耗量差值反映胰岛素抵抗的程度。葡萄糖含量用葡萄糖检测试剂盒测定。在胰岛 素抵抗模型