熄风舒络胶囊对血瘀性脑缺血大鼠血液流变学及其相关调节因子的作用.pdfVIP

熄风舒络胶囊对血瘀性脑缺血大鼠血液流变学及其相关调节因子的作用.pdf

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熄风舒络胶囊对血瘀性脑缺血大鼠血液流变学及相关调节因子的作用* 1 1** 1** 2 1 1 王瑞琼 ,王志旺 ,刘永琦 ,赵 斌 ,颜春鲁 ,程小丽 1 2 (甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000 ; 甘肃省成县中医院,甘肃 成县 742500 ) 摘 要 目的:研究熄风舒络胶囊对血瘀性脑缺血大鼠脑组织形态学、血液流变学及血管相关调节 因子的作用。方法:采用多次肌内注射地塞米松后结扎双侧颈总动脉复制血瘀性脑缺血大鼠模型,检测大 鼠体重变化、血液粘度、血管相关调节因子及脑组织病理学,研究熄风舒络胶囊对实验性脑缺血的保护作 用,探讨作用机制。结果:熄风舒络胶囊(3.56g/kg )能明显减缓模型大鼠的体重减小(P<0.05),1.78~3.56g/kg 熄风舒络胶囊(1.78、3.56g/kg )能降低模型大鼠的全血粘度及血清 NO 、NOS 及 ET 含量(P<0.01),熄 风舒络胶囊(0.89、1.78、3.56g/kg )能使模型大鼠CGRP 显著升高(P <0.05,0.01),且均能改善缺血脑组 织形态学。结论:熄风舒络胶囊具有抗脑缺血的作用,改善血液流变学、影响血管相关调节因子水平可能 是主要的作用机制。 关键词 熄风舒络胶囊;脑缺血;血液粘度;血管调节因子 熄风舒络胶囊是甘肃省成县中医院的院内纯中药制剂,由葛根、天麻、蜈蚣、地龙、姜黄等组成,具 有养血通督,熄风舒络等功效,对脑动脉硬化、中风后遗症等所致的督脉失养、风痰阻络证有确切的疗效。 为进一步探讨熄风舒络胶囊对血瘀性脑缺血的治疗作用及作用机制,本研究采用血瘀性脑缺血大鼠模型, 研究熄风舒络胶囊对大鼠血液粘度、血管相关调节因子及脑组织形态学的影响,为临床用药提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 试验药物 熄风舒络胶囊,甘肃省成县中医院提供,批号地塞米松,国药集团容生制 药有限公司生产,批号人参再造丸,北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产,批号: 1015827。 1.2 动物 SPF 级 Wistar 大鼠,雄性,体重 180~200g,由甘肃中医学院实验动物中心提供,质量合格证 号 SCXK (甘)2004-0006。 1.3 试剂 一氧化氮(NO) 试剂盒,批号一氧化氮合成酶(NOS) 试剂盒,批号: 考马斯亮蓝蛋白试剂盒,批号均由南京建成生物工程研究所提供;内皮素(ET) ELISA 试剂 盒,批号,降钙素基因相关肽(CGRP) ELISA 试剂盒,批号,均由上海源叶生物 科技有限公司提供。 1.4 仪器 全自动血液流变仪,北京普利生仪器有限公司,型号:LBY-N6 ;组织匀浆机,北京中科科尔 仪器有限公司,型号:GEN125 ; 可见分光光度计,上海元析仪器有限公司,型号:N-5600PC;酶标仪, 美国 BioRad 。 1.5 方法 参照文献[1],取大鼠 48 只,按体重随机分为 6组,即正常对照组,模型对照组,人参再造丸组(0.86g/kg, 相当于临床成人日用量的 10 倍),熄风舒络胶囊高、中、低剂量组(3.56、1.78、0.89g/kg,相当于临床 成人日用量的 20、10、5 倍),每组8 只。给药组组大鼠按上述剂量灌胃相应药物 10mL/kg,正常对照组与 模型对照组灌胃等量蒸馏水。连续 12d;首次给药后除正常对照组外,其余各组大鼠肌内注射地塞米松 (0.2mg/kg),正常对照组注射等量生理盐水,1 次/d,连续 12d。末次给药前禁食 9h,末次给药 1h后用 10%水合氯醛麻醉大鼠,分离并结扎双侧颈总动脉,60min后,股静脉采血并分离血清;另取静脉,血肝素 抗凝,全自动血液流变仪测全血黏度;取血后处死大鼠并取脑组织,常规石蜡切片,HE染色,进行组织形 态学观察,按试剂盒说明书测定血管相关活性物质(一氧化氮、一氧化氮合成酶、内皮素及降钙素基因相 关肽)水平,试验期间观察大鼠的一般状态,并称重。 所有实验数据采用(x ±s)表示,用 SPSS11.5 统计软件分析,组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA ),P<0.05 组间差异有统计学意义。 2 结果 2

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