蓖麻种子毒蛋白抗癌活性及热稳定性的探讨.pdfVIP

第 3O卷 第 1期 河南大学学报 医学版 Vo1．30 NO．1 2O11年 2月 JournalofHenanUniversity MedicalScience Feb．2011 蓖麻种子毒蛋 白抗癌活性及热稳定性的探讨 张 洪 ，敬永升 ，陈 元 ，王 聪 ，刘纯纯 ，郭书杰 ，李 申 ，王富茹 ， 王洪涛 1_河南大学生命科学学 院 生物S-程研 究所 ，河南省重点学科动物转基 因与细胞工程开放 实验室 ，河南 开封 475004； 2．河南大学 药e-院 分 析化e-实验 室，河 南 开封 475004 摘 要 ：目的：了解蓖麻 毒蛋 白 Ricin 及从 大戟科植 物 蓖麻种子 中提 取 出来 的一种核糖体 失 活蛋 白的热稳 定性 和 抗肿瘤活性 。方 法：利用亲和层析的方法纯化蓖麻种子毒蛋 白，并通过 SDS 测其热稳定性 、抗肿瘤性 。结果 ：Ricin在 37℃的缓冲液 中保温 60h，没有明显 的降解；能有效地杀死食管癌细胞 EC109。结论 ：Ricin是有前途的蛋 白类抗肿瘤药物 。 关键词 ：核 糖体失活蛋 白；抗癌活性 ；稳定性 中图分类号 ：R285．6 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—7606 2011 01 0047 04 Studyontheantitumoractivityand theheatstabilityofRicin ZHANG Hong ，JING Yongsheng ，CHEN Yuan ，WANG Shu—jie，I．IShen，WANGFu—ru ，WANG Hong—tao t1．InstituteolBi engi7leering。Collegeol1．ifeScience，HenanUniversity．KaiJeng，Henan475004，China；Open l，Ⅱbo KeyAnimalTransgenic、SandCellEngineering Sut~jectsoJ HigherEducationoJ HenanProvimeKai ng， Henan475004，Chink 2．Analyticalchemistrydepartmant，Pharmaceuti~alCollegeofHenanUniversity，Kai ng， Henan 475004，China Abstract：Objeetive： Tostudy theanlitumoractivityandtheheatstabilityofRicin，akindoftheribosome inactivating proteins RIP isolated from castor bean， euphorbia．M ethods： Ricin was purified by affinity chromatography on Sepharose4B．itsheatstabilityandantitumoractivitywererespectivelydetectedbySI S— andMTT Inethod．Results： Ricincanexistinbuffersolutionfor60hourswithoutdegradationat37℃ andcankill esophagealcancercellsEC109．Conclusion： Ricinisakindofproteinwhichhasabroadprospectofantitumor． Keywords：R1P；Antitumoractivity；Stability 1888年 ，Stillmark从大戟科 Euphorhiaceca 植 蓖麻毒蛋 白作为 1种核糖体 失活蛋 白 ribo— 物蓖麻 Ricinuscornmuni．sIinne 种子 中分离得到 1 someinactivatingprotein，RIP ，是研 究核糖体 结构 种对红细胞有强烈凝集活性的蛋 白质，并命名为蓖麻 和功能的一 个重要工具 ，也一直受 到人们 的，泛关 毒素 Ricin 以来 ，蓖麻 毒素作为高毒性 的生物大分 注 j。它是 由RNAN一糖苷酶活性 的A链 分子量为 子 ，一直都是人们研究 的热点 。在第一次世界大战期 3lKD 和具有凝集素活性 的 B链 分子量为 34KD 间 ，美国一直在研究蓖麻毒素的潜在军事用途 。第二 构成 ，A链具有 N糖苷 酶 的活性 ，能通过催 化水 解 次世界大战期 间，英 、美分离 了代号 wA 的蓖麻毒 60S大亚基 28SrRNA 中第 4234位腺嘌呤与核糖分 素 ，用于制造生化武器 。 子之间的糖苷键 ，使核糖体大小亚