6尿液的微生物学检验改.docVIP

玉溪市人民医院 检验科微生物室 临床微生物学检验SOP文件 项目名称：尿液的微生物学检验(培养) 编号：YX-CX-XJ- 日期：2004年10月 日 1 使用方法:平板分离（或平板倾注）法+手工（或仪器）菌种鉴定和药敏试验。 2 检测原理：同上呼吸道标本的微生物学检验SOP文件。 3 标本: 中段尿 唯泌尿系统的感染与检出细菌数有关，面必须报告单位容积内受检尿液的细菌数量，方法是用接种尿液的细菌总数乘以尿液被稀释的倍数即可。 3.1 病人装备：原则上应选择在抗菌药物应用之前采集尿液。 3.2 标本类型：中段尿或肾孟尿。 3.3 标本要求： 3.3.1 常采用中段尿采集方法，女性外阴部或男性尿道口先以肥皂水清洗，再以清水冲洗，然后排尿弃去前段尿，留取中段尿于无菌容器内，立即加盖送检。 3.3.2 通常应取晨起第一次尿液送检。 3.3.3 尿液中不得加防腐剂或消毒剂。 3.3.4 尿液标本采集后应尽快送检，否则会影响细菌检查的正确性。 4 材料设备：同上呼吸道标本的微生物学检验SOP文件。 5 细菌培养： 5.1 尿定量培养：针对多数患者普通需氧菌或？性厌氧菌的细菌培养可采用以下方法： 5.1.1 倾注平板法: 首先将无菌生理盐水9.9ml 分装在大试管中 , 加入被检尿0.1ml, 充分混匀 , 使成 100 倍稀释。取此液 1ml 放入直径 9cm灭菌平皿内 , 同时加入已融化并冷至 50 ℃的营养琼脂培养基,与尿混匀,待凝固后置 35 ℃培养 , 生长菌落数乘以 100 即相当于每 ml 中菌数。 5.1.2 平板接种法:用定量接种环取尿液,平板画线法接种在血平板培养基上,待表面干燥后 ,35 ℃培养过夜 , 计数生长的菌落数 ,求出每毫升的菌落数。若无细菌生长，则继续培养至48小时，观察并记录结果。 5.2 如果是检查特殊细菌 , 如淋球菌等则不需定量培养。 淋病奈瑟菌培养: 接到标本后立即接种于淋球菌平板上 , 置 35 ℃ 5%～10%C02 环境下培养 24h, 若无菌生长 , 则继续培养至 48h 。若有小而隆起、湿润、透明的菌落 , 涂片镜检为革兰阴性肾形双球菌 , 则按淋病奈瑟菌进行鉴定。 6 细菌鉴定 6.1 仪器法: 根据菌落特点、涂片染色镜检情况及触酶、氧化酶结果用VITEK-32自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定(见仪器操作SOP文件)。 6.2 手工法: 见手工法细菌鉴定操作SOP文件。 7 药物敏感试验 7.1 仪器法: 用VITEK-32自动微生物鉴定仪进行药物敏感试验(见仪器操作SOP文件)。 7.2 手工法: 见手工法细菌药物敏感试验操作SOP文件。 8 结果报告 8.1 报告每毫升菌落数(cfu/ml)； 8.2 报告细菌种类名称； 8.3 报告药敏试验结果：K-B法报告S.I.R定性结果；仪检法同血液…SOP文件。 9 质量控制：同上呼吸道标本的微生物学检验SOP文件。 10 临床意义 尿液细菌学检验可以反映肾脏、膀胱、尿道、前列腺等处的炎症变化。肾孟肾炎和膀胱炎中的致病菌为大肠希菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、产气肠杆菌、变形杆、铜绿假单胞菌、腐生葡萄球菌和不动杆菌等。尿液的细菌学检验除有诊断价值以外 , 还可以帮助临床医师选择有效抗菌药物 , 以减少因用药不当而造成的耐药菌株的增加。 诊断泌尿系感染的细菌学标准是: 菌落计数≥105cfu/ml(革兰阴性杆菌)或≥104 cfu/ml(革兰阳性球菌) 。但尿菌落计数低于此标准 , 并不能完全排除尿路感染。这多见于以下几种情况: (1) 应用抗菌药物 , 尿中细菌发育受到抑制 ; (2) 病原菌发育要求条件高 , 尿中细菌受营养条件限制而繁殖受抑制 ; (3) 尿频时 , 膀胱内细菌停留时间短而细菌数量则少 ; (4) 大量输液或使用利尿剂后 , 使尿液稀释 ; (5) 尿液 pH5.O 或 8.5, 细菌发育受阻 ; (6) 采尿时外阴部的消毒剂混入尿中。 11 其他：对使用过的培养基以及其他被污染器材的处理见……… 12 参考文献 [1]中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程 （第版） 1997。 [2]孔繁林编.临床常见细菌鉴定表解[M]. 昆明:云南科技出版社，1993。 编写人签名 复审人签名 审批人签名 执行日期 姓 名： 编写日期：2004年8月 姓 名： 交审日期：2004年9月 姓 名： 审批日期：2004年10月 临床微生物学：尿液的微生物学检验 第1版第0次修改 第 2 页 共 3 页