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Colitag大肠菌群和埃氏大肠杆 菌快速检测方法 主要内容 • 基本概念 • Colitag方法特点 • 基本介绍 • 检测过程 • 第三方认可 基本介绍 • 总大肠菌群酶底物法 在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群落， 该细菌群落能分解色原底物释放色原体使培养基呈现颜色 变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法称为总大肠 菌群酶底物法 • 埃氏大肠杆菌酶底物法 在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶，分解色原底 物，释放出色原体，从而使培养基颜色发生变化。同时， β-葡萄糖醛酸酶分解产生荧光物质，使菌落能够在紫外光 照射下产生特征性荧光，以此技术检测埃氏大肠杆菌的方 法称为埃氏大肠杆菌酶底物法。 Colitag方法特点 • 可以检测到受损大肠菌群和埃氏大肠杆菌。其它方法检测 这些受损菌时常会遗漏。 • 操作过程简单。检测准确度高，假阳性和假阴性是目前最 低的。 • 检测时间短于传统方法。 基本介绍 • 检测时间：24 小时 • 美国国家环保局等权威机构测试结果：假阴性0 ，假阳性小于5% • 检测微生物种类：可同时检测大肠菌群和埃氏大肠杆菌，或同时检 测粪大肠杆菌和埃氏大肠杆菌 • 检测结果表达方式：可检测有/无，也可检测最可能细菌数（MPN ） • 检测所需配套设备：可调恒温培养箱（至少可以控制35+0.5 摄氏度 和44.5+0.2 摄氏度），专用试管（如果只检测“有/无”则不需要此 项），366 nm UV灯（用366 nm UV灯照射观察荧光）。 • 方法权威性：美国国家环保局认可的标准快速检测方法; 中国国家 标准中规定的“酶底物”法；日本、韩国、法国和巴西等国家的国家 标准。拥有“acid resuscitation”新技术专利 • 检测下限：1CFU/100mL 液体 检测过程 1. 取一包检测试剂，与100 mL 被测液体混合； 2. 摇匀混合，充分溶解，若要定量则转移溶液至定量盘，在35 摄氏度 的环境下培养22-26 小时。培养后的水样进行以下认定： A：如果水样呈黄色，说明有大肠菌群存在； B：如果用366 nm UV灯照射呈现明显蓝色荧光，说明埃氏 大肠杆菌存在。 3. 如果检测粪大肠菌，则先在35 度环境下培养4 小时后，改成44.5 度 培养20小时，进行以上第3项观测。 A：如果水样呈黄色，说明有粪大肠菌存在； B：如果用366 nm UV灯照射呈现明显蓝色荧光，说明埃氏大 肠杆菌存在 第三方认可 （1 ）美国EPA认可： 美国EPA 目前已经认可10种用于检测大肠菌群和埃氏大肠杆菌的方法，其中Co litag 是美国EPA 认可的检测数据最好的一种。 Colitag通过美国国家环保局严格的检测程序，结果表明：colitag检测大肠菌群和 大肠杆菌的假阴性为0% ，假阳性小于5%。这个结果首先是由美国国家环保局的生 物学家以正式信函的形式通知CPI 公司。后来这一结果在2002年3月的《联邦登记》 （Federal Register ）上发表，具体请见67卷45期第10538页（Page 10538, Vol. 67 N O. 45 ）。同时，美国国家环保局对另一方法的检测报告显示，该法检测大肠杆菌出 现9%的假阴性，检测大肠菌群出现13%的假阳性，此结果发表于1989 年7 月17 日 的《联邦登记》（第29998页，第二段，B部分第三行）和1992年6月10 日的《联邦 登记》（第27475 页，第一列的第一整段）。 （2 ）美国Wisconsin 州卫生实验室验证： 美国Wisconsin 州卫生实验室通过大量不同实际样品对美国EPA认可的10种该 类方法进行了检验，发现只有两种方法分析采样结果完全正确。Colitag是其中一种。