SV40T胃壁细胞中特异性表达转基因小鼠的建立及生物学特性.pdfVIP

第九届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 疾病动物模型研究  SV40T 胃壁细胞中特异性表达转基因小鼠 *  的建立及其生物学特性  1  2  3  1 *  金 辉  ，陈 辉  ，杜春燕  ，张钦宪  （1．郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，郑州  450052；  2．郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室，郑州  450052  3．郑州大学实验动物中心，郑州  450052） 【摘要】目的 建立SV40T胃壁细胞特异性表达转基因小鼠， 为胃癌发病机制的研究提供动物模型。 +  +  方法 将胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(­)/HKSV中的3.8kb H /K ATPase β promoter/SV40T基因片段 酶切回收， 利用显微注射法制备转基因小鼠，P CR  和Southern blotting  检测阳性转基因小鼠并建系繁殖， 免疫组织化学检测基因的特异性表达。 结果将422  枚经显微注射后的受精卵移植到16  只假孕雌鼠输卵 #  #  #  #  #  #  管，共生出77只仔鼠，移植成功率为18.2 %(77/422)。在出生的77只仔鼠中，2 、4 、8 、16 、24 、51 、  #  #  #  #  #  57 、61 、68 、73 共10个品系经PCR检测为阳性首建鼠。除68 不育外，其他9个品系首建鼠共生出99只  F 代鼠，经PCR  和Southern blotting  检测发现31只阳性鼠，阳性率为31.3 %(31/99)。免疫组织化学检测  1 F 代阳性鼠均仅在胃组织中有SV40T基因的表达，而在心、肝、肾、肺、肠、骨骼肌、睾丸等组织器官 1 中均不表达。 结论 建立了胃壁细胞特异性表达SV40T基因转基因小鼠动物模型。 【关键词】SV40T基因；Southern blotting；免疫组织化学；转基因小鼠 【中图分类号】R789  Establishment and Characterization ofTransgenic Mouse  Expressing SV40Tagin Parietal Cells  1  2  3  1 *  JIN Hui , CHEN Hui , DU CHUN­yan , ZHANG Qin­xian  (1.Department of Histology and Embryology, College of Basic Medical Sciences, Zhengzhou  University, Zhengzhou 450052, China;  2.Department of Cell Biology and Medical Genetics, College of Basic Medical Sciences,  Zhengzh