HepG2细胞培养方法与条件的探讨.pdfVIP

维普资讯 实用预防医学 2005年2月 第 12卷 第 1期 PracticalPreventiveMedicine，Feb．2005，Vol12，No．1 7l 文章编号：1006—3110(2005)O1—0071 03 【论 著 】 HepG2细胞培养方法与条件的探讨 唐孟萱，周万军，胡元佳，陈卫群，王晓春 摘要： 目的 探讨HepG2细胞最优培养方法与培养条件。 方法 对比40℃先溶解后37℃水浴恒温与传统37 ℃复苏方法效果以选择最佳的复苏方法；观察不同比例胎牛血清培养基下细胞生长情况以确定最佳的血清含量 ；观察不 同汇合度下细胞生长趋势及死活细胞比例以选择恰当的传代时机；观察不同消化方法的消化效果以选择合适的消化方 法。 结果 40℃先溶解后37℃水浴恒温的复苏存活率 (85．7％)明显高于传统 37℃复苏方法 (68．4％)；在含 l2％以 上胎牛血清的DMEM 中细胞生长 良好；汇合度达95％～100％时细胞生长趋势达到平台期，100％以后活细胞逐渐减少而 死细胞逐渐增加；应用先PBS洗涤后0．25％胰酶消化的传代方法 易于控制，消化效果好。 结论 HepG2细胞采取40 ℃先溶解后37℃水浴恒温的复苏方法 ，含 l2％胎牛血清DMEM培养基培养 ，采用先PIkS洗涤后胰酶消化的方法于汇合 度95％～100％时传代的方法进行培养，能获得最佳培养效果。 关键词： HepG2；细胞培养；条件；探讨 中图分类号：Q813．1 1 文献标识码 ：A TheDiscussion011HepG2cIJCultureMethodandCondition TANGMeng一 砌 ，ZH0UWan—jun，HUYuan jia，甜 ai．(DepartmentofMedicalLaboratory，CollegeofMedicalTechnologyandInformation，CentralSouthUniversity，Changsha 410013，Hunan) Abstract： Objective ToprobeintothebestculturetechniqueandconditionofHepG2． Methods Comparethere— suscitatino effectofdissolvingin40℃ advanceplus37℃ withthe tradition37℃ resuscitationmethod．COnfirm the bestse— rurncontentbyobservingthe grow circusofHepG2indifferentserum contentuc ltureme dium ．Chooes the bestseparatetime bybo es rvingthe ce llgrowntrendandproportionoflifeanddeathce llindifferentconvergence de gree．Choo sethe appropriate ． dige stme thodbyobserving the dige steffectofdifferentdige stmethod． Results Thereusscitationlivabilityofdissolvein 40℃ avdanceplus37℃ resuscitationmethod (85．7％)iSevidentlyhigherthanthe traditino 37℃ resuscitatino me thod (68．4％)．CellsgrowwelIinDMEM th