三种樟科植物的细胞总DNA提取.pdfVIP

云 南 植 物 研 究 　2004 , 26 (4) : 451～457 　　　　　　　　　　　　　　　　　 Acta Botanica Yunnanica 　　　　　　　　　　 三种樟科植物的细胞总 D NA 提取 1 1 1 1 1 2 徐 　虹 , 郑 　敏 , 章 　军 , 朱斌琳 , 张娆挺 , 袁文杰 ( 1 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 , 厦门大学生命科学学院 , 福建 厦门　361005 ; 2 厦门市药品检验所 , 福建 厦门　361012) 摘要 : 为了从富含次生代谢物的樟科植物肉桂 、锡兰肉桂 、阴香中获得高质量 DNA , 研究和 改进了 CTAB 法 、高盐低 p H 法和尿素法 。改进方法包括 : 1) 在裂解液中加入 2 % β- 巯基 乙醇和 5 % PVP , 以防止氧化褐变的发生 ; 2) 在酚 : 氯仿抽提前加入 15 molL 醋酸铵冰浴 处理 , 能降低DNA 的黏性 。所得DNA 的质量和产量经电泳 、紫外吸收A260 A280 、PCR 扩增和 限制性内切酶酶切检测 , 结果表明改进法提取的 DNA 质量要 比常规法的好 。其中改进 的 CTAB 法获得的DNA 纯度最高 , 能用于 PCR 扩增和限制性内切酶酶切 , 是提取这 3 种樟科植 物总 DNA 的最佳方法 。 关键词 : 肉桂 ; 锡兰肉桂 : 阴香 ; DNA 提取 ( ) 中图分类号 : Q 946 　 　文献标识码 : A 　 　文章编号 : 0253 - 2700 2004 04 - 0451 - 07 Isolation of Total Cellular DNA from Three Species of Lauraceae 1 1 1 1 XU Hong , ZHEN G Min , ZHAN G Jun , ZHU BinLin , 1 2 ZHAN G RaoTing , YUAN WenJie ( 1 The Key L aboratory of Ministry of Education f or Cell B iology and Tumor Cell Engineering , School of L if e Sciences , Xiamen University , Xiame