三种益生菌混合培养及共生机理研究.pdfVIP

工业微生物 No．2 第38卷第2期 Vd，38 2008年4月 Indmtrial Apr．2008 Microbiology 三种益生菌混合培养及共生机理研究 薛胜平1”， 杜连祥¨， 路福平1 (1．天津工业微生物重点实验室，天津科技大学，天津300457； 2．河北经贸大学，生物科学与工程学院，河北石家庄050061) 摘要 确定酪酸茵、肠膜芽孢杆菌与粪肠球菌三种茵混合工艺。研究了三种茵混合培养的生 长曲线，混合批式传49代、混合连续培养考察三种茵的共存稳定性。三种菌无细胞上清液彼此之 间均有促进生长作用，混合培养液的茼数较单独培养增加，在稀释率0．042／h，填充床连续培养 lld，三种茵可稳定共存，但批式传49代过程中，肠膜芽孢杆茵有消失现象，而酪酸菌、粪肠球菌均 较传代前增加了100倍。平板打孔生长圈法、点种法实验分别表明酪酸茵、肠膜芽孢杆菌对粪肠球 茵有显著的促进作用，连续培养较批式传代可更好的研究茵际关系。并得到简单易行的复方益生 茵剂组方方法。 关键词：细菌相互作用； 混合培养； 益生茵； 连续培养； 传代法 多种微生物的混合培养具有广阔的应用前景， 粪肠球菌EnterococcusT．110(Ef)。以上菌 faecalis 混合体系是靠原始协同、互相扶助和偏利共生来维 株为天津科技大学应用微生物研究室保留菌种。 持稳定状态【1]，微生物菌群中存在的拮抗与互助是 1．2培养基 群落的重要自稳机制【2]，混合菌剂在人体微生态环 肉汤培养基培养：肠膜芽孢杆菌。 境中具有有更大的缓冲能力与环境适应能力，其中 粪肠球菌培养基(g／L)： 酪酸菌、肠膜芽孢杆菌与粪肠球菌作为复合微生态 制剂已使用了45年【3】，目前对具有协同关系菌株的 膏5，葡萄糖2，pH7．2～7．4。 筛选和组合缺乏有效的方法与理论指导【4]。同时， 改良RCM培养基(g／L)： 益生菌剂组方及其比例关系缺乏理论依据b】，复合 胰蛋白胨10，酵母膏3、氯化钠5、L-半胱氨酸 7．5，培养酪 菌剂菌际生态关系不清，混合培养时菌与菌之间多 0．3、乙酸钠3、K82P044，CaC035，pH 呈不均衡生长。Iato【6’71采用剔除法、批式传代法研酸菌，高管半固体RCM用于酪酸菌计数。 究了天然混合纤维素降解菌体系的共存机制。本文 肠膜芽孢杆菌与粪肠球菌混合培养基(g／L)： 4， 探讨该三种菌共生机理，采用连续培养技术与批式 淀粉10，蛋白胨20，酵母膏4，KH2P04 传代法比较研究了酪酸菌、肠膜芽孢杆菌与粪肠球 7。 CaC031，pH 菌的共存稳定性。 上述培养基均121℃、20min灭菌。 1．3方法 1 材料与方法 1．3．1混合培养 1．1菌