乌头草的急性毒性观察和心脏毒性的测定.docVIP

新疆乌头草的急性毒性石河子大学药学院，新疆 石河子 832002摘要：目的 研究了新鲜乌头草的急性毒性。方法 采取新鲜乌头草，粉碎榨汁；小鼠灌胃新鲜乌头草汁，观察小鼠所出现的毒性反应并测定。结果结论 新鲜乌头草有很大的急性毒性，。关键词乌头草；急性毒性；乌头草毛莨科乌头属多年生草本植物，因植株体内含有乌头碱而具一定毒性。新疆乌头草分布较广，田边、林带、山坡均生长茂盛，哈密分布以天山北坡为主。由于近年来草场过度放牧，草场退化导致生态失衡，乌头草每年以5-10%的速度递增而泛滥成灾，随着人民生活水平的提高，回归大自然，食用野菜已成为一种新的消费观念，由于乌头草外型色泽与野芹菜极为相似，采集野芹菜中夹杂乌头草事件日益频繁和增多，因误食“乌头草”引起中毒的病例在逐年增加[1]。对于乌头碱中毒的临床表现和作用机制的研究屡见不鲜，然而关于新鲜乌头草中毒的实验研究很少。本文就新鲜乌头草的急性毒性进行了报道，可为临床治疗乌头草中毒病人提供依据，为制定防治乌头草中毒的指南提供实验数据和基础材料与方法 受试药物 天山乌头草鲜500 g，由新疆哈密市红星医院医务科主任管小江老师鉴定提供，加入适量液氮，冷冻粉碎，再加入500 ml蒸馏水榨汁，过滤收集到600 ml乌头草汁液。-80℃冷藏备用。 实验动物 昆明种小鼠0只，雌雄各半，体重18~22 g，由新疆地方疾病控制中心实验动物室提供，合格证号: SCXK（新）201000103。动物房适应5d后开始试验。 实验方法 预实验 取体重18~22 g小鼠20只(雌雄各半)，禁食不禁水12 h，分5组，每组4只。gxj195966@126.com 用5倍稀释的不同剂量乌头草汁灌胃，造成不同程度动物死亡，参照文献方法进行LD50的测定[2]。分别用0/4与4/4致死剂量组，递增或递减一定比例的剂量，再次实验，找出0％和100％死亡剂量的所在范围。 急性毒性实验 取体重18~22 g小鼠50只(雌雄各半)，灌胃前禁食不禁水12 h ，分5组，每组10只。根据预试时的致死情况，计算出乌头草汁中毒的相应剂量，并由此配制出一系列不同浓度的药液。将不同浓度的药液分别给各组动物灌胃给药1次，体积均为20 m/kg。给药后每日观察，连续2周，正常饮食。记录动物毒性反应及死亡数。观察的指标包括一般指标：动物外观、行为、分泌物、排泄物；动物死亡情况：死亡时间、濒死前反应。记录所有的死亡情况、出现的症状，以及症状起始的时间、严重程度、持续时间、是否可逆。对于所有的试验动物进行解剖，器官出现体积、颜色、纹理改变时，记录并进行组织病理学检查。 组织病理学检查 离体心脏灌注模型 实验方法根据 (Ji, Y. et al.) [],取大鼠称重，腹腔注射60 mmol·L-1的水合氯醛 (0.35 g·kg-1，ip) 麻醉。迅速开胸取出心脏，置于95% O2和5% CO2混合气体充分饱和4的K-H（NaCl 118.3 mmol/L、KCl 4.74 mmol/L、CaCl2 1.2 mmol/L、KH2PO4 1.18 mmol/L、MgCl2 1.2 mmol/L、NaHCO3 24.9 mmol/L、Glucose 11 mmol/L，HCl调节pH值为7.4）液中，然后将心脏固定于Langendoff装置上，用95% O2和5% CO2混合气体充分饱和的K-H缓冲液恒压逆行灌流。剪开左心耳，球囊从左心耳插入左心室，球囊内压调至5-10 mmHg。球囊导管连接压力换能器，与生物多导仪相连，连续记录心功能左心室舒张压 (LVEDP)、左心室收缩 (LVSP)、左心室发展压 (LVDP, LVDP = LVSP - LVEDP)，生物记录软件自动分析左心室压力升高速率 (+ dp/dtmax)、左心室压力降低速率 (- dp/dtmin) 以及心率(HR)，以计滴器实时记录冠脉流量 (CF)。分组给药处理如下：（1）组：以K-H液平衡灌流 min；（2）高剂量组：以K-H液平衡灌流30 min，改用含μg/ml 天山乌头草的K-H液灌流10 min，K-H液再灌 min；（3）剂量组：以K-H液平衡灌流30 min，改用含μg/ml 天山乌头草的K-H液灌流10 min，K-H液再灌 min；（4）低剂量组：以K-H液平衡灌流30 min，改用含μg/ml 天山乌头草的K-H液灌流10 min，K-H液再灌 min。以生理记录仪记录灌流全过程心功能变化情况，以软件自动分析再灌注5min、1 min、0 min、30min、40min、50min和 min时间点各指标情况以反映心功能状况。以前0min数值为基础值100%，实验结果以缺血前心功能百分率表示。 数据处理 所有实验数据以。采用SPSS 10.0软件处理，origin6.0进