五种祛风湿类中药对小鼠T淋巴细胞的影响研究.pdfVIP

第 23 卷　第 4 期 中 　医 　药 　学 　刊 Vol. 23 No. 4 2 0 0 5 年 4 月 CHINESE 　ARCHIVES 　OF 　TRADITIONAL 　CHINESE 　MEDICINE Apr . , 2 0 0 5 ( ) 文章编号 :1009 - 5276 2005 04 - 0651 - 03 五种祛风湿类中药对小鼠 T 淋巴细胞的影响研究 林 　力 ,王 　耘 ,王春梅 ,乔延江 (北京中医药大学中药学院 ,北京 100102) 　　摘 　要 : 目的:应用小鼠体外 T 淋巴细胞模型 ,对几种常见祛风湿类中药进行体外实验研究。方法 :无菌 分离小鼠脾脏 ,制备脾淋巴细胞 ,与待测药物预孵 1 小时 ,加入刀豆蛋白 A 刺激剂继续培养 ,总计培养 72 小 时后收获细胞 ,进行 MTT 染色 , 以酶标仪进行测定。结果:放线菌酮对 T 细胞有强的抑制作用 ,其 IC50 为 401 ×10- 4mol/ L ,五种祛风湿类药材对小鼠 T 淋巴细胞均有一定的抑制作用 ,其中五加皮的抑制作用最强。结 论 :可以把应用 ConA 诱导的 T 淋巴细胞作为药物抗炎活性筛选的一种模型。 关键词 :MTT;放线菌酮 ;T 淋巴细胞 ;祛风湿类中药 中图分类号:R - 05 　　文献标识码 :B 　　淋巴细胞是人体最主要的免疫细胞 ,它在人体的免 14 　主要试剂 　RPMI1640 培养基和硫酸链霉素购自 疫方面起着重要的作用。其中的 T 细胞主要中介细胞免 GIBCO BRL ;胎牛血清购自兰州民海生物工程有限公司 ( ) ( ) 疫功能 ,抑制其过度增殖可用于某些自身免疫性疾病 ,如 ;刀豆蛋白 A Concanavalin A ,Con A 购自美国 ( ) 类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等。有研究发现 T 细 Sigma ;MTT ,二甲基亚砜 DMSO ,HEPES ,二巯基乙醇和氨 胞在风湿性关节炎的病理环节中起着重要的作用[1 、2 ] , 苄青霉素购自 Amresco 。 [3 ] 国内已有学者 研究其对淋巴细胞的影响 ,但尚未见到 2 　方法与结果 用 MTT 法对其进行测定。由于 MTT 法具有简便、快速、 2 1 　药物制备 　阳性药放线菌酮 　将样品用 PBS 缓冲 经济等特点 ,因此本文应用已建立的 MTT 法测定条件 , 液溶解 ,配制成 10- 2mol/ L 的工作溶液 ,依次稀释使浓度 - 3 - 7 对放线菌酮及五种祛风湿类中药进行测定 , 计算出其 为 10 到 10 mol/