儿童紫癜性肾炎肾组织VCAM1的表达及其意义.docVIP

儿童紫癜性肾炎肾组织VCAM-1的表达及其意义 　　作者：卢立肖,陈晓英,林瑞霞,杨青,陈敏广　　作者单位：温州医学院附属育英儿童医院 肾内科，浙江 温州 325027 　　【摘要】目的 ：探讨紫癜性肾炎(HSPN)患儿肾活检组织血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达情况及其意义。方法 ：应用免疫组化技术检测8例HSPN和7例薄基底膜病(对照组)通过肾穿刺活检术获得的肾组织VCAM-1表达情况(用IOD值表示)，分析其与肾脏病理、主要临床指标(包括24 h尿蛋白、尿红细胞)的关系。结果：对照组的肾组织仅少量表达VCAM-1;HSPN患儿的肾小管、肾间质及肾小球中VCAM-1表达均增加，以小管间质部位为著，并随ISKDC肾病理级别的增加而增强;平均肾组织VCAM-1表达的IOD值在Ⅲ-Ⅳ级组为(6.54±2.02)×105，在Ⅰ-Ⅱ级组为(2.45±0.07)×105，对照组为(0.76±0.12)×105，Ⅲ-Ⅳ级组与Ⅰ-Ⅱ级组均明显高于对照组(均P 0.01)，且Ⅲ-Ⅳ级组高于Ⅰ-Ⅱ级组(P 0.05)。HSPN患儿的肾组织VCAM-1表达的IOD值与其ISKDC肾病理分级呈显著正相关(r =0.866，P 0.01)，与IgA和C3沉积量均无显著性相关(r分别为0.339、-0.436，均P 0.05)，与24 h尿蛋白量呈显著正相关(r =0.755，P 0.05)，而与尿沉渣红细胞量无显著性相关(r =-0.626，P 0.05)。结论 ：VCAM-1参与了HSPN的发生、发展过程，其肾组织的VCAM-1表达可反映其病情的严重程度。 　　【关键词】 紫癜性肾炎;血管细胞黏附分子-1;肾组织;儿童 　　紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis，HSPN)作为儿科最常见的继发性肾小球疾病之一，虽然其大多预后良好，但约15%的患者会有活动性肾脏病，约3%～20%的患者会发展到肾衰竭[1-2]，然而它的确切病因和发病机制至今尚未完全清楚。近几年来血管细胞黏附分子-1(vascular cellular adhesion molecule-1，VCAM-1)在HSPN发病中的作用也引起研究者的重视[3-4]，但对其肾组织VCAM-1表达的研究甚少，为了探讨VCAM-1在儿童HSPN肾组织的表达情况及其可能起的作用，我们对8例HSPN患儿及7例病理学改变为薄基底膜病的患儿肾组织VCAM-1表达进行检测，现报告如下。 　　1 对象和方法 　　1.1 研究对象 病例来源于2006年1月至2007年4月间住院于我科并行过肾穿刺活检术的8例HSPN患儿(HSPN组)，年龄7～12岁，其中男5例，女3例;均符合中华医学会儿科学分会肾脏病学组于2001年制定的HSPN诊断标准[5]。对照组标本来自我科住院的7例病理学改变为薄基底膜病的患儿，年龄7～13岁，其中男4例，女3例。两组在性别构成及年龄上差异无显著性(P均0.05)。 　　1.2 检测指标和方法 　　1.2.1 生物学指标：所有HSPN病例均于肾活检当日送检24 h尿蛋白定量和新鲜尿沉渣红细胞半定量。 　　1.2.2 肾组织VCAM-1的检测：一抗采用武汉博士德公司的兔抗人VCAM-1多克隆抗体，二抗采用北京中杉公司试剂盒，检测方法按试剂盒说明书进行。封片后，自然晾干，尽快观察，并使用自动显微照相装置在显微镜下摄取图像。肾组织的VCAM-1表达采用 Image-Pro Plus5.0 医学图像分析软件，400×光镜下计数每张切片单位视野内的累积光密度(IOD)，IOD为经标准灰密度校正后，在同等条件下测得的阳性物质的平均总分减去平均背景积分。IOD能反映选定区域的蛋白表达总量，是阳性面积与阳性平均光密度的乘积。图片放大倍数表示物镜倍数乘目镜放大倍数。在统一放大倍数(40×10)下，每张切片随机选取4个视野，取其平均值。 　　1.2.3 肾组织病理检测：分别行光镜、免疫荧光及电镜检查。光镜行HE染色，PAS染色，Masson染色，PASM染色;免疫荧光行IgA、IgG、IgM、C3、C4、Clq等检查。病理诊断分级按中华医学会儿科学分会肾脏病学组修订的国际儿童肾脏病研究中心(ISKDC)分类标准[5]，分为6级。 　　1.3 统计学处理方法 多组样本均数比较进行方差齐性检验，组间比较比较采用单因素方差分析，方差齐者两两比较采用LSD法，方差不齐者进行Dunnetts T3检验。相关分析采用Bivariate过程的Spearman等级相关分析。 　　2 结果 　　2.1 HSPN患儿肾组织病理检查结果 8例HSPN患儿的肾组织病理诊断及ISKDC分