克隆法研究辐射诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因突变.pdfVIP

第 卷 第 期 辐 射 防护 25 l VoI . 25 No . l 2005 年 月 Radiation Protection l Jan . 2005 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 克隆法研究辐射诱发人外周血 淋巴细胞!#$ 基因突变 崔凤梅 赵经涌 劳勤华 王六一 洪承皎 宁 萍 （苏州大学放射医学与公共卫生学院， ） 2l5007 摘 要 本文目的是用克隆法研究 射线诱发人外周血淋巴细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸抗糖转移酶 ! （ ）基因突变的量效关系。从健康成年人外周血分离淋巴细胞，每份分成两等份，其中一份加滋养 HPRT 细胞，另一份不加滋养细胞，种于 孔板，进行淋巴细胞的克隆和突变细胞的筛选，比较二者结果；剂量 96 效应关系实验为取一健康成年男子外周血 分成 等份，分别用 、、、和 照射，分离淋巴细 25 mL 5 0 l 2 4 6 Gy 胞，种于96 孔板，不加滋养细胞条件下观察淋巴细胞的克隆效率和HPRT 基因突变频率的变化。结果表 明加滋养细胞组的克隆效率高于不加滋养细胞组（ ），但二者 基因突变频率无差别（ ! 0 .0l HPRT ! 0 .05）。在一定剂量范围内，人外周血淋巴细胞克隆效率与照射剂量呈负相关， 基因突变频率与照 HPRT 射剂量呈正相关。 关键词 HPRT 基因 辐射 克隆效率 基因突变频率 人外周血淋巴细胞 经过多年的研究，人们对次黄嘌呤鸟嘌呤 阻断半保留复制，造成细胞死亡。而当细胞 磷 酸 核 糖 转 移 酶 （ 基因突变后，不能编码生成 ， Hypoxanthine-Guanine HPRT HPRT 6-TG ， ）基因突变的检 就不能掺入到 中，不影响复制。因此，在 PhosphoribosyI Transferase HPRT DNA 测方法、分子机理、突变图谱等已经有了较多的 含 的选择性培养基中， 基因突变的 6-TG HPRT 认识，特别是对 HPRT 基因突变作为辐射生物 细胞存活，非突变型细胞则死亡。在这些方法 剂量计进行了深入而广泛的研究。已有的研究 中，多核细胞法、放射自显影法及5-溴脱氧尿嘧 ［］ l 表明 ， 基因位点突变对辐射敏感，可以 啶法尽管操作简单，但只能对 基因进行