凝血酶影响血管内皮细胞通透性的实验研究.pdfVIP

( ) 第29卷　第5期 吉　林　大　学　学　报　 医　学　版 V ol. 29　N o. 5　 　 ( ) 　 —640 — 2003年 Journal of J ilin U niversity M edicine Edition 2003 　　[ 文章编号]　1671587 (2003) 凝血酶影响血管内皮细胞通透性的实验研究 1 2 1 △ 辛　华 , 郑雅娟 , 韩振国 , 王立岩 ( 1. 吉林大学中日联谊医院胸外科, 吉林 长春 130031; 2. 吉林大学第二医院眼科) [摘　要]　 目的: 评价凝血酶对血管内皮细胞通透性的影响及其机制。方法: 在体外培养血管内皮单 细胞层, 并测定凝血酶引起的血管内皮单细胞层电阻变化。结果: 凝血酶能够迅速降低血管内皮单 细胞层的电阻; 而肌球蛋白轻链激酶抑制剂M L 7 能够抑制凝血酶引起的血管内皮单细胞层电阻 变化。结论: 凝血酶可以升高血管内皮细胞肌球蛋白轻链的磷酸化水平, 从而导致血管内皮细胞通 透性增高。 [ 关键词]　凝血酶; 细胞膜通透性; 内皮, 血管; 肌球蛋白轻链激酶 [ 中图分类号]　 25; 　 55　　[ 文献标识码]　 Q Q A 　　近来有研究表明凝血酶作为一种炎症介质可以 13　测定 HUV EC 单细胞层电阻　将培养有 [ 1 ] 单细胞层的细胞培养皿放入装有正负电极 损伤血管内皮, 引起组织、器官水肿和功能障碍 , HUV EC 其原因被认为是凝血酶损伤血管内皮屏障功能造成 的培养容器 (ENDOHM 12, U SA ) 内, 与电阻仪 的。内皮通透性是检测内皮屏障功能的客观计量指 (EVOM X 用组织抵计一式,U SA ) 相 标。本文作者在实验中测定了凝血酶引起的血管内 连, 记录 HUV EC 单细胞层的电阻值; 然后将 - 1 ( ) 皮单细胞层电阻变化, 阐明了凝血酶对血管内皮细 0. 025 凝血酶 日本 株式会社 加 mol L 胞通透性的影响, 并对血管内皮细胞通透性发生改 入细胞培养皿内, 连续记录 HUV EC 单细胞层的电 变的机制进行了初步探讨。 阻变化。另一组实验: 将肌球蛋白轻链激酶抑制剂 1　材料与方法 7 (5、30 - 1 ) 分别与 单细胞层共 M L mol L HUV EC 11　细胞培养　本研究所用细胞引自日本 同培养1 h , 用M 199细胞培养液洗涤3 次后, 记录 JCRB CellBank。人脐静脉内皮细胞(HUV EC ) 培养 HUV EC 单 细 胞 层 的 电 阻 值; 然 后 加 入 在涂有胶原层的细胞培养皿表面, 使用含10% 小