细菌标准操作规程3.doc

通辽市医院检验科 微生物室作业指导书 营养琼脂配制 标准操作规程 文件编号：XX-JY-CZ-XJ-XXX 版本 生效日期： 共 页 第 页 1.目的 规范营养琼脂培养基配制的操作规程，保证培养基质量。 2.原理 培养基含有氮源、碳源和微量无机盐。适宜细菌生长繁殖。 3用途 供细菌培养、菌株纯化及传种使用。 4.配方 营养琼脂干粉28g、蒸馏水1000ml。 5.操作步骤 将28g营养琼脂干粉溶于1000ml蒸馏水中，混匀至完全溶解，分装，经121℃灭菌15分钟，冷藏备用。 6..储存条件 2~8℃冰箱。 7.有效期 实验室自行规定，确保培养基质量。 8.质量控制 8.1 质控频度 每次新配制时做质控。 8.2 质控方法及结果见表5-17 通辽市医院检验科 微生物室作业指导书 营养琼脂配制 标准操作规程 文件编号：XX-JY-CZ-XJ-XXX 版本 生效日期： 共 页 第 页 表5-17 配制营养琼脂培养基质控方法及结果 试验 方法 结果 无菌试验 100块抽检5%，100块随机取10块，35℃培养24~48h 无细菌生长 生长试验 金黄色葡萄球菌ATCC25923，35℃培养24~48h 菌落浅黄色 铜铝假单胞菌ATCC27853,35℃培养24~48h 菌落无色或浅绿色，直径2.5mm 平行试验 做质控时，取新旧批号的培养基同时做 9.注意事项 倾注时温度不易过高，否则冷凝水过多易污染；若温度过低，琼脂易凝固。 通辽市医院检验科 微生物室作业指导书 血琼脂培养基配制 标准操作规程 文件编号：XX-JY-CZ-XJ-XXX 版本 生效日期： 共 页 第 页 1.目的 规范血琼脂培养基配制的操作规程，保证培养基质量。 2..原理 羊血或兔血等是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可疑完好保存血液中某些布耐热的生长因子，同时血细胞不被破坏。若将Nacl浓度提高道0.85%，可使血平皿在35℃培养18~24小时后色泽仍然鲜艳。 3用途 供一般病原菌的分离培养培养、溶血性鉴别及保存菌种用。 4.配方 特殊蛋白胨23g、淀粉1g、氯化钠5g.、琼脂10g、无菌脱纤维羊血（或兔血）5%~10%,ph 7.1~7.5。 5.操作步骤 将上述成分混匀，溶于1000ml蒸馏水中，加热溶化，校正ph,121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃加入无菌血液，充分摇匀后竞逐平板，待凝固后冷藏备用。血琼脂层厚4mm。 6..储存条件 2~8℃冰箱。 7.有效期 实验室自行规定，确保培养基质量。 8.质量控制 8.1 质控频度 每次新配制时做质控。 8.2 质控方法及结果见表5-18 表5-18 配制血琼脂培养基质控方法及结果 试验试验 方法 结果 无菌试验 100块抽检5%，100块随机取10块，35℃培养18~24h 无细菌生长 生长试验 化脓性链球菌ATCC 19615,35℃培养18~24h 生长良好，β溶血 肺炎链球菌ATCC 6305，35℃培养18~24h 生长良好，α溶血 金黄色葡萄球菌ATCC 25923，35℃培养18~24h 生长良好，β溶血 大肠埃希菌 ATCC 25922，35℃培养18~24h 生长良好 平行试验 做质控时，取新旧批号的培养基同时做 平行 9.注意事项 倾注时温度不易过高，否则血细胞易被破坏而溶血；若温度过低，琼脂易凝固。 通辽市医院检验科 微生物室作业指导书 巧克力培养基配制 标准操作规程 文件编号：XX-JY-CZ-XJ-XXX 版本 生效日期： 共 页 第 页 1.目的 规范巧克力琼脂培养基配制操作规程，保证培养基质量。 2..原理 流感嗜血杆菌生长依赖血液中的X及V因子，当培养基加热至80~90℃时，可使血液中的红细胞破裂释放出X、V因子，以利于嗜血杆菌的生长培养。 3用途 主要用于嗜血杆菌的分录培养，亦可用于奈瑟菌的增殖培养。 4.配方 牛肉浸出液1000ml、蛋白胨10g、氯化钠5g.、琼脂15g、无菌脱纤维羊血100ml，ph 7.2~7.4。 5.操作步骤 将前4项成分混合，加热溶化，校正ph,121℃高压灭菌15分钟。冷却至80~85℃