磷酸氯喹对白血病细胞株的影响.pdfVIP

中国实验诊 断学 2011年 4月 第 15卷 第 4期 文章编号：1007—4287(2()11)04—0571—05 磷酸氯喹对 白血病细胞株 的影响 刘 佳 ，陈芳源 ，王海嵘 ，钟 华 ，钟济华 ，王利民 ，欧阳仁荣 (上海交通大学医学院附属仁济医院 1．血液科 ，2．中心实验室，上海 200001) 摘要 ：目的 本实验以药物磷酸氯喹干预白血病细胞株，观察其对 白血病细胞生长凋亡的影响，同时研究用药后 凋亡相关蛋 白Pnas一2的变化，以探寻磷酸氯喹作用 白血病细胞株机制。方法 MTF法检测药物干预后 白血病细胞增 长情况；AnnexinV／sytox标记细胞 以流式细胞仪检测药物干预前后细胞凋亡情况的差别；激光共聚焦观察蛋 白Pnas一2 的亚细胞定位 ，蛋 白印迹实验检测药物作用前后 ，Pnas一2表达量 的变化。结果 50ug／mL的磷酸氯喹能够诱导 白血病 细胞株凋亡。并发现凋亡相关蛋 白Pnas一2在 白血病细胞株中存在异常定位和过量表达。磷酸氯喹能够使 白血病细胞 株中Pnas一2蛋 白的表达量及亚细胞定位发生变化。结论 磷酸氯喹能够抑制 白血病细胞株生长 ，诱导凋亡，机制可能 是恢复了Pnas一2蛋 白的异常定位及表达。 关键词 ：磷酸氯喹；白血病细胞株；PNAS-2；凋亡 中图分类号 ：R733．7；R979．1 文献标识码 ：A Theeffectofchloroquinephosphate on leukemia ceR lines LIU 胁 ，CHEN Fang-yuan ，WANG Hai—rong ，eta1． (1．DepartmentofHematology，2．Centrallaboratory，RenJiHospital，ShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine，Shanghai 200001，China) Abstract：Objective Inthisstudy，wetreatedleukemiacelllineswithchloroquinephosphatetoobserveitseffectO13htecell lines．BesidesweexploredchangesofhteproteinPnas一2aftertheinterventionofthedrug，inordertofoundthemechanism ofthedrug thatinfluencedleukemiacelllines．M ethods Chloroquinephosphateofdefferentconcentrationswasaddedintotheculturefluidat logaritlnnicphase．MTFassayWas usedtomeasurethecellproliferation，flow cytometryWas appliedtodetectthecellapoptosis，im— mun0f】uorescencetechnologywasemployedtoobservethesubcellularlocationofproteinPnas一2，andWestern blotwasusedtocompare theexpressioncontentofPnas一2．Resets 50m ／mLchloroquinephosphatecouldinduceleukemiccelllinestoapoptosis．Andin leukemiccelllines，proteinPnas一2’SexpressioncontentWaSmorethannon-tumorcelllines，anditssubeelM arlocationwasabnormal， too．Simultnaeously．htedrugcouldrevertPnas一2’sabnormal subcellularlocationanditsredundantexpressioncontent．Conclusion chloroquinephosphatecouldinhibitthegrowthofleukemiccelllinesandinduceapopto