山楂叶总黄酮对AS模型大鼠PPARαLXRABCA1mRNA表达的影响.pdfVIP

山楂叶总黄酮对AS模型大鼠PPARot、LXR、ABCAlmRNA表达的影响 高英英 欧芹国圃 马 雷 (佳木斯大学基础医学院，黑龙江佳木斯154007) [摘要) 转运。降低Tc的负荷，从而达到防止AS发生的危险。 【关键词)动脉粥样硬化；PPARa；LXR；ABCAl；胆固醇逆向转运 【中图分类号】R-33【文献标识码】A [文章编号)1005-9202(加儿)13-2502-03 动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是冠状动脉疾病、脑卒 1．2方法 中和周围动脉疾病等多种老年心脑血管疾病的主要病理基础。 1．2．1分组与给药对照组喂以基础饲料；AS模型组和给药 发病率和死亡率极高。在AS发生和发展过程中，血管内皮的 组按照60万U／kg体重一次性腹腔注射维生素D，，以高脂饲料 损伤及血液中单核细胞黏附是AS病变的重要环节，其中巨噬 (高脂饲料配方：胆固醇3％、胆酸钠0．5％、丙基硫氧嘧啶 细胞源性泡沫细胞的形成是AS病变形成和发展的核心步 0．2％、白糖5％、猪油10％、基础饲料81．3％)喂养旧】。饲养 骤…。迄今关于巨噬细胞在胆固醇吞噬、代谢和流出等方面的 4W后，内眦静脉取血，对所有大鼠进行血脂水平分析，确定造 确切机制仍不十分明确。目前，相关研究表明过氧化物酶体增 模成功。第5—8周期间，继续喂以高脂饮食，并于每日上午 殖物激活受体Ct(PPARa)的活化与巨噬细胞中胆固醇的流出 9：00定时灌胃，给药组按250mg／kg体重山楂叶总黄酮配成混 关系密切。本研究旨在通过观察PPARa活化后对肝脏x受体 悬液2IIlI灌胃，As模型组给予同等量生理盐水灌胃。最后一 (LXR)、三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCAl)mRNA表达的 次给药后次日断尾取血，处死大鼠，于大鼠主动脉弓与胸主动 影响，探讨PPARa在AS发生、发展和治疗中的作用及机制。脉交界处取血管，冷生理盐水漂洗，置于冻存管液氮保存。 1．2．2基因表达的检测采用半定量RT．PCR法测定血管壁 l材料与方法 PPA胁、LXR、ABCAl mRNA的表达。精确称取大鼠相同部位 1．1材料 血管1g，采用RNAiso 1．1．1动物清洁级Wistar大鼠30只，体重(225±25)g，由 佳木斯大学实验动物中心提供。全部大鼠分笼饲养，自由进食 5．0 和饮水。房间湿度在50％左右，温度(25．4-1)℃。动物在实验内参基因，引物均采用PrimerPCR引物设计软件自行设 室适应性饲养lW后用于实验。将大鼠随机分为对照组、AS模 计，由大连宝生物工程有限公司合成。见表1。 型组和给药组，每组10只。 1．1．2药品与试剂山楂叶总黄酮购自临沂爱康药业有限公 表1基因的引物序列 司，批号AKH010一B，纯度为90％。RT·PCR试剂盒购自大连宝 生物工程有限公司。维生紊D，注射液为上海通用药业股份有 限公司产品，批号090810；丙基硫氧嘧啶为上海复星朝晖产品。 批号091209；胆固醇、胆酸钠、琼脂糖、无水乙醇、异丙醇、氯仿 等为国产分析纯。 基金项目：黑龙江省教育厅课题(N；佳木斯大学校级课题 (No．$2010一j04) 通讯作者：l魏晓东l(1956·)，男，硕士生导师，主要从事衰老与抗衰老机 制研究。 Buffer Free 第一作者：高英荚(1980·)，女，在读硕士，主要从事中药抗动脉粥样硬MgCl22一，10×RT 1一，RNasedH203．75山，dNTP