环介导等温扩增技术在检测细菌性肺炎常见致病菌中的应用.pdfVIP

· · 576 ．论著． 环介导等温扩增技术在检测细菌性肺炎 常见致病菌中的应用 戴然然 刘嘉琳 万欢英 【摘要】 目的 应用环介导等温扩增(LAMP)方法对肺炎患者痰液常见致病菌进行核酸检测，研究 LAMP方法在细菌性肺炎病原学诊断中的价值。方法抽提75例肺炎患者痰液细菌DNA。根据肺炎 常见8种致病细菌设计引物，应用LAMP技术扩增DNA，实时检测样本荧光信号，对定量结果应用不同 界值进行定性分析，并分别与痰培养结果进行比较。结果 LAMP技术扩增的细菌核酸产物，以细菌浓 度1×104为界值，阳性率为68．O％，与痰培养结果符合率为56．0％；以细菌浓度1×105为界值，阳性 率为50．7％，与痰培养结果符合率为58．7％；以细菌浓度1×106为界值，阳性率为30．7％，与痰培养结 果符合率为53．3％。上述三组阳性率与痰培养阳性率比较，以细菌浓度1×105为界值组阳性率与痰 培养阳性率差异无统计学意义。进一步研究在以1×10：为界值时LAMP和痰培养方法对8种细菌的 检出率，LAMP方法对部分细菌检出率高于痰培养方法，尤其对于苛养菌。结论LAMP方法可以简便 迅速扩增细菌性肺炎患者痰液中常见致病菌核酸，从而明确感染病原菌类型。LAMP扩增产物以细菌 浓度l×105为界值，与痰培养方法比较，细菌检出率高。尤其对于苛养菌，LAMP方法有显著优势。 【关键词】细菌性肺炎；诊断；环介导等温扩增 Valueof isothermaI indetectionofcommon ofbacteriaI I∞p-mediatedampIifi∞tion pathogens pneumonia DAJ R口n—r口行，LJU．，in—Zi规，wA～H“口”一yi行g．工k户口rf研P竹ro，RPs户i，‘nfDry^dPdifi行P，R“iJi”HDspi￡口￡ foMPdic口Z 200025，I[疆i”口 口．厂，“i口￡Pd CoZZPgPo，S|Iln”g，lniJi口o￡o升gU行i钟，苫打y，Shn行g^ni I面r，℃s户。雄di行g口“f^Dr：wA小J H。f口”一yi行g，Er”niz：坶一锄行2006(多yn^oo．∞柳．c咒 To thevalueof isothermal 【Abstract】objectiveinvestigate loop—mediated amplification(LAMP) inthe ofbacterial nucleicaciddetectionofcommon through assay etiologydiagnosis pnuemonia pathogens DNA in LAMPmethod．Methods wasextractedfrom75 pneumoniapatientsby Sputum pneumonia was LAMP．Thefluorescenceof weredetectedreal_time by signalsproducts by patients．DNAamplified atdifferent PCR．The resultswere cutoffvalues，andthedatawere qua