链霉菌StreptomycesolivaceoviridisA1木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌及毕赤酵母中的高效表达.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! ’( ) ! *’ ) ! 年 月 #$$% ! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-.,/0 #$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 链霉菌 !#$% ’( )$* +,-.)$-,#,/,* 0 ! 木聚糖酶基因 1( 20 在大肠杆菌及毕赤酵母中的高效表达 ! ! ! ! ! # # 张红莲 姚 斌 王亚茹 袁铁峥 张王照 伍宁丰 范云六 ! （中国农业科学院饲料研究所，北京 !$$$4!） # （中国农业科学院生物技术研究所，北京 !$$$4!） 摘 要 从橄榄绿链霉菌 3/*%4/(520% (,#6+0%(6#*#7# 6! 中克隆出木聚糖酶基因82$9 ，将带与不带原基因信号肽编码 序列的 分别以正确的阅读框架克隆到大肠杆菌表达载体 （ ）上的 信号肽编码序列之后，得到 82$9 A71##? D 4%,,. # 种构建的重组载体，在重组大肠杆菌中木聚糖酶得到了表达，表达产物具有生物活性。进一步将不带原基因信号 肽编码序列的82$9 插入到毕赤酵母转移载体AEFG 中，转化毕赤酵母得到重组子，在重组子中木聚糖酶基因得到 了高效分泌表达，在摇床培养水平上的表达量达到#$$=HI J，且表达产物具有生物学活性。 关键词 木聚糖酶KL*6，高效表达，毕赤酵母 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） M245 6 !$$$1%$5! #$$% $!1$$3!1$9 ［］ 木聚糖（ ）是一种多聚五碳糖，是植物半纤 究5 ，此酶具有较好的酶学性质，有望在生产实践中 K0(,- 维素的重要组分，它占植物碳水化合物总量的!I%， 实际应用，本文报道木聚糖酶基因82$9 在大肠杆菌 在自然界中是继纤维素之后含量第二丰富的再生生 和毕赤酵母中的表达，为进一步工业化廉价生产木 ［］ ! 物资源 。 聚糖酶奠定基础。 ， 木 聚 糖 酶 （， ， 1! 31 ! 31 1N1;0(,-’O0P/’(,Q8 ! ! ! 材料与方法 G% R !R# R 4）可将木聚糖降解，其主要产物为低聚糖 和木二糖。木聚糖酶可广泛应用于制浆造纸、饲料、 ! ! 菌种与质粒 ［］ # 食品和能源工业中 。 3/*%4 /(520% (,#6+0%(6#*#7# 6! 菌株为中国农业科 木聚糖酶广泛存在于微生物中，目前已从不同 学院饲料研究所生物技