大鼠骨髓间充质干细胞的分离_培养及鉴定.pdfVIP

20 11 51 24 山东医药 年第 卷第 期 、 大鼠骨髓间充质干细胞的分离 培养 及鉴定 1，2 ，3 1 3 ， ， 周达岸 郑洪新 李 静 (1 ， 110032 ;2 ; 辽宁中医药大学研究生学院 沈阳 辽宁医学院 3 辽宁医学院附属第三医院) : 、 (MSC)。 、 3 摘要 目的 体外分离 培养及鉴定大鼠骨髓间充质干细胞 方法 全骨髓贴壁法体外分离 培养 月 SD MSC ， MSC ， 、 、 龄 大鼠 利用差速贴壁原理纯化 并通过形态学观察 细胞表面抗原标志物 多细胞系诱导分化对其进 。 P3 CD CD ， CD CD ， MSC 。P3 MSC 行鉴定 结果 代不表达抗原 34 和 45 表达抗原 29 和 44 符合 表面标志物特征 代 定向 ALP 、 、 O 、 、 诱导后经 染色 矿化结节染色 油红 染色 Ⅱ型胶原荧光染色后鉴定具有骨向分化 脂向分化及软骨分化能 力。结论 全骨髓贴壁法能够建立稳定的MSC 体外分离培养体系。 : ; ; ; 关键词 间充质干细胞 全骨髓贴壁法 流式细胞术 细胞分离 中图分类号:R394 ． 2 文献标志码:B 文章编号:1002-266X (2011)24-0050-02 骨质疏松症(OP)是以低骨量和骨组织微细结 软骨分化诱导液:10 － 7 mol / L Dex ，37 ． 5 μmol / L ， VitC ，6 ． 25 g / ml ，50 ng / ml TGF- ，2 ． 5% 构破坏为特征 致骨脆性增加的一种全身性骨骼疾 μ 胰岛素 β ， 。2009 12 ～ 病 具有高致残率和高病死率 年 月 FBS 。 20 10 12 ， 年 月 我们运用贴壁筛选法体外分离培养 1． 4 SD MSC 、 大鼠 的分离 培养与传代 骨髓间充质干细胞(MSC)， ， 并对其进行鉴定 为探 1． 4 ． 1 全骨髓贴壁法 无菌条件下分离双下肢股 OP MSC 讨补肾益髓中药含药血清干预 大鼠 骨向分 ，PBS ， 。 骨 冲洗 切除双侧干髓端 注射器吸取含 化提供理论基础。 10% FBS G-DMEM 5 ml ， 10% 的 完全培养基 加入 肝 1 材料与方法