Atrophin—1全长基因稳定转染和瞬时转染真核细胞系的表达分析.pdfVIP

中国现代神经疾病杂志2011年2月第 11卷第 1期 ChinJContempNeurolNeurosurg，February2011，Vo1．¨，No．1 ． 论 著 ． Atrophin—全长基因稳定转染和瞬时转染 真核细胞系的表达分析 张鑫 顾卫红 王 国相 【摘要】 目的 建立正常 (CAG重复次数为 19次)和异常(CAG重复次数为82和66次)atrophin，』 [齿状核红核苍 白球路易体萎缩 (DRPLA)致病基因]全长基因真核表达体系，通过观察细胞形态及蛋 白 质表达水平和分布情况 ，比较稳定转染和瞬时转染两种细胞表达体系，为进一步研究建立 良好的细胞模 型。方法 基于 已构建的GFPatrophin一1．Q19／Flp—InTREx293和GFP—atrophin．1Q82／FIp—InTREx293两 种稳定转染细胞株 ，利用 四环素调控系统Tet—on诱导表达 。正置荧光显微镜观察正常与异常atrophin．1 融合蛋 白在细胞中的表达定位，电子显微镜观察细胞超微结构的改变；脂质体介