枇杷MADSbox基因EjMADS1的克隆及其序列分析.pdfVIP

福建农业学报 23(3)：231～234，2008 FujianJournalofAgriculturalSciences 文章编号 ：1008—0384 (2008)03—0231—04 枇杷 MADS--box基因EjMADS1的克隆及其序列分析 鞠玉栋 ，陈永快 ，洪建基 ，郑回勇 (福建省农业科学院甘蔗研究所 ，福建 漳州 363005) 摘 要 ：利用同源克隆方法克隆了一条枇杷花发育相关基 因，序列结构和同源性分析表 明：该基 因属 MADS box基 因。该基 因在枇杷 中为首次克隆，暂命名为 MADS1，基因长 517bp，编码 171AA。 关键词 ：枇杷 ；克隆；序列分析 中图分类号 ：S667．3 文献标识码 ：A CloningandsequenceanalysisofEjMADS1，aMADS--boxgenefrom loquat (EriobotryajaponicaLind1) JU Yu—dong，CHEN Yong—kuai，HONGJian-ji，ZHENGHubyong (SugarcaneResearchInstitue，FujianAcademyofAgriculturalSciences，Zhangzhou，Fujian 363005，China) Abstract：AMADS-boxgenewasclonedfrom loquat((EriobotryajaponicaLind1)andnamedEjMADS1．These— quencecomparisonandhomologyanalysisoftheclonedgeneshowedithighlyhomologoustoMADS-boxgenefami— ly．Thesequenceof MADS1genewas517bp in length，which encodes171aminoacids．Thededucedpeptide containsaconservativeMADS-boxdomainandasemi-conservativeK domain． Keywords：Loquat；MADS-box；cloning；sequenceanalysis 枇杷 (EriobotryajaponicaLind1．)是蔷薇 1 材料与方法 科苹果亚科枇杷属亚热带常绿果树 ，目前我国的栽 培面积已达 ll万 多 hm。，产量达 30多万 t_】j，是 1．1 试验材料 一 种深受人们喜爱的南方佳果 。开花是高等植物生 供试枇杷品种为早钟 6号 ，采收的枇杷花蕾置 活史 中的一个重要生理现象_2]，它使得高等植物得 于液氮 中带 回实验室 ，于一70。C保存备用。 以生存并繁殖后代 。近年来通过对拟南芥和金鱼草 1．2 主要试剂及酶类 的花 同源异型突变体的分离和研究，克隆了一系列 ExTaq酶、dNTPs、3一FullRACECoreSet 调控花发育的同源异型基 因，提 出了花发育的 Ver． 2．0、DNA Marker、AgaroseGelDNA Puri— ABC模 型，之后又提 出了ABCD模型和 ABCDE ficationKitVer．2．0、PMD 19一T SimpleVector 模型[3 ]。无论哪种模型，其 中所涉及的大部分基 均购 白大连宝生物工程公司；X—gal、IPTG为上 因都属于MADs—box家族基因，该基因家族编码 海生工产品；其他试剂均为国产分析纯 。 一 类转录因子 。枇杷作为木本果树 ，其童期较长。 1．3 方法 开展枇杷花发育基 因克隆和相关研究有助于揭示其 1．3．1 RNA 的制备与检测 采用 CTAB法_7提 花发育的分子机