斑节对虾白斑症的发病历程.pdfVIP

‘ 维普资讯 第 21卷第 5期 暨南太学学报 (自然科学版 ) Vn1．21No．5 2000年 1O月 JournalofJinanUniversity(NaturalScience) Oct．2O∞ 7p一7 斑节对虾 白斑症 的发病历程 谢数涛。，何建国，声丘盔 ，吕 玲，江静波 (1 中山大学生命科学学院，广东 广州 ．510275；2华南农业大学动物医学系 广东 广州 ，510642；3 湛江水产研究所 ，广东 湛江 ，524039) [摘 要] 目的：探讨对虾 白斑症的病程及病症特点 方法：剥健康斑节对虾进行人工感染．同时 用套式 PCR检测感染后斑节对虾血 液 中病毒核酸 的相对含量 结 果 ：斑节对 虾感染 白斑症病毒 后 ．依次表现出厌食 、不活动、体色变红 、甲壳 出现 白斑 、反应迟钝直至侧卧死亡 ；濒死对虾的典型 症状为空胃、红体 、甲壳 白斑、甲壳下水肿及 甲壳易剥离；感染对虾 出现拒食后 ．其血液 中自斑症病 毒(wssv)DNA的相对含量急剧增加 结论 ：甲壳下水肿和 甲壳 易剥离可能是斑节对虾 白斑症的 0 一仿 j cf 47 对虾 白斑症是近年来 害亚洲地区对虾养殖业 的主要流行病 ，一般认为其病原是一种不 形成包 涵体 的杆形 DNA病毒—— 白斑症病毒 (W]hiIespots)~Mromevires，WSSV)[t3．该病 自 1993年在全 国范围内暴发以来 ，每年均导致养殖对虾的大规模毁灭性死亡 ，至今 尚未得到有 效控制 ． 白斑症发病历程 的研究是 白斑症发病和致病机理研究的基础 ，明确对虾 白斑症 的病程及 病症特 点，也是正确选取病虾材料 、现场或用人工感染方法诊断对虾 白斑症 的依据 ．有关此方 面的内容 ，国内外的相关文献多有涉及，但一般仅静态描述 白斑症的病症 ．其结果也常有不同 程度 的差异 ． 作者 以我国南方海 区的主要养殖对虾——斑节对虾为材料，通过人工感染 ，以所建立的聚 合酶链式反应 (PcR)监测对虾体 内病毒核酸相对含量的变化 ，对斑节对虾 白斑症 的发病历程 进行研究 1 材料与方法 1．1 对虾 健康斑节对虾系 1998年 5月取 自广东省遂溪县一未发病虾场 ．患 白斑症的斑节 对虾系 1998年4月取 自广东省湛江市区一发病虾场 ，一70U保存 1．2 WSSV的部分纯化 取病虾的鳃 ，剪碎后按约 1g鳃组织 ：10mL溶液 的比例 ，加^ 缓冲液 (50~uaol／LTfis — HCI，pH76，04mol／LNaCI)制备成匀浆液 ．4℃，7000r／min离心 如 rain去渣 ，033 微 f收稿 日期] 20OO—Ol— 基【金项 目] 国家 自然科学基金 资助项 目 [作者简介] 谢数涛 (1968～)，男 ，蝴北京 山人，讲师 ．博士 维普资讯 第 5期 谢数涛等 ： 斑节对虾 白斑症 的发病历程 71 孔滤膜过滤 ，再在 4~C，15000r／rain离心50mln，沉淀加约 1O倍体积的 TN缓冲液溶解+即得 部分纯化 的WSSV． I．3 人工感染 投喂感染 ：对虾在感染前饥饿 24h．对照组共 10只对虾 ，投喂健康对虾 的腹部肌 肉；感染 组 (10只对虾)投喂患 白斑症病虾的腹部肌 肉．观察 到对虾摄食 感染材料 (呈饱 胃状 )后 ，即清 除剩余残块 ，并开始计时 ． 注射感染 ：对照组共 10只对虾 ，于每只对虾第 3腹节肌 肉注射健康对虾组织匀浆液 (细菌 滤器过滤)0