糖皮质激素受体及其反应元件.pdfVIP

f；一 《生命的化学}1997年 17卷 4期 13 糖皮质激素受体及其反应元件 孙琳琳 宋亮年 (第二军医 秭商 葫 ；30o4㈤ 美薯词 糖皮质激素受体 糖皮质澈帐 应元件 一 — — 一 糖皮质激素受体 (GR)是核受体超家族 中的重要成员，也是一种典型的激素依赖性 转录调节 因子，与激素结合后通过和靶基 因 中的糖皮质激素反应元件 (GRE)相互作用， 调节靶基 因的表达，并最终 引起各种生物学 效应 。GR与GRE的相互作用是一个非常复 杂的过程 ，并决定着激素作用的特异性 。 1．GR的分子结构与功能 GR具有两个基本功能域 ：位于 C一末端 的激素结合区和位于分子中部的DNA结合 区(DBD) 其中，激素结合区决定着受体与 激素结合的特异性 ，而 DNA结合区由两个 锌指结构组成，决定着受体与靶基因相互作 用的特异性。利用核磁共振及 XL线衍射对 GR 的 DBD 三维 结构研 究表 明[】]，GR 的 DBD由两个亚区构成，每一亚区由锌指区一q 黑旋一延伸区组成，其中a一黑旋始 自锌指砷 的 第 3及第 4个Cys，终至其后的延伸区。GR 的这两个功能域对受体功能是至关重要的， 不管是激素结合 区还是 DNA 结合区发生突 变，均可导致受体失去激素结合活性或DNA 结合活性，在临床上则表现为糖皮质激素抵 抗症。除了上述两个基本功能域外 ，在受体分 子 c_末端还含有与热休克蛋白(hsp)相互作 用的区域以及受体的二聚体化区等。 2．糖皮质激素反应元件 ’ GRE为位于靶基因启动子 附近钓一段 特异性核苷酸序列 ，能与GR特异结合并介 导受体的转录调节活性 。通过 比较 25种糖皮 质激素靶基 因中的GRE结构，得到其共享 序列为啪： 14 《生命的化学)1997年 17卷 4期 台，而．Val一443则通过疏水作用与 T 结合 ER的DBDN一端 区，则该嵌台受体只能使古 (图 1)。虽然 用晶体 结构 分析表 明 GR 的 有 GRE的报告基 因激 活，但用 GR 的 DBD DBD 不与 GRE中的 T 及 T 直接相互作 C一端区取代ER的DBDC一端区，则嵌台受体 用 ，但用高锰 酸钾干扰等方法研究表明 ]，改 仍只能激活古有ERE的报告基因。将 ER的 变GRE中的T 及T 可影响GRE与GR的 DBDP盒 (P box)中的 Glu一439、Gly一440、 DBD的结合t用不台甲基的u取代GRE的 Ala一443分别突变为GR特异 的氨基酸残基 T ，可使 GRE结台GR的能力明显降低，说 Gly、Ser、Va1(GSV 突变体)，则突变后的ER 明T 中的甲基对GRE与GR 的结合具有重 只能激活古 GRE的报告基 因；同样，将 GR 要作用 。但是 ，用U 取代T 中的甲基并不影 的 DBDP盒 中的Gly一439、Ser一440、Val一443 响GRE与 GR的结合，说明T 中的甲基对 分别 突变为 ER 的 DBDP盒 中相应 的氨基 GRE与 GR的结台不重要 {另外，GRE中的 酸 (EGA 突变体)后 ，只能激活含 ERE的报 6位不管是 C还是 T均不影响其活性 ，说 明 告基因。上述结果袁 明，决定受体DNA 结合 受体