诱变后抗高温防蜡菌的性能评价和机理分析.pdfVIP

石 油 地 质 与 工 程 2012年 9月 PETR0LEUMGE0L0GYANDENGINEERING 第 26卷 第 5期 文章编号：1673—8217(2012)05—0141—04 诱变后抗高温防蜡菌的性能评价和机理分析 郝春雷，常国栋 ，王新亮，赵 阳，王 剑，彭元东 (中国石化河南油 田分公司石油工程技术研究院，河南南阳 473132) 摘要 ：为提高防蜡茵KB的抗高温能力，对其进行紫外诱变，诱变后菌株命名为 KB28。KB28在 60~70℃的繁殖、 代谢表活剂和 降解原油能力都 明显强于原始株 KB，防蜡率受高温影响不大，可达 77．5 。诱变茵在 30～50℃条 件下的繁殖能力和 降解原油能力较诱变前均没有 明显增加 ；不过在 35~60℃范围内，诱变菌株 的防蜡率和代谢表 活剂能力均有显著提高。诱变茵在致病性方面的突变没有 出现 ，可以安全使用。 关键词 ：微生物防蜡 ；紫外诱变；抗高温 ；代谢表活剂 ；降解原油 中图分类号 ：TE357 文献标识码 ：A 蜡在原油生产过程中极易析出、凝结，沉积在井 10g原油 。 壁上，造成抽油泵负荷增大及蜡卡等状况_1]。微 LB培养基 ：胰蛋 白胨 10、酵母提取物 5、NaC1 生物清防蜡技术由于有许多突出优点，如无须增加 5，蒸馏水 1L，pH7．5。 油井设施 ，对地层无伤害，不污染环境等 ，已得到 了 固体培养基 ：LB培养基加 2 琼脂粉 ，加热灭 广泛应用_4吖]。目前微生物防蜡 的方式主要是将菌 菌后冷却。 液 由油套环空加入从泵 口循环至油管内发挥作用， 实验原油：泌 304区块赵安 4005井原油 ，粘度 而含蜡油井井底温度通常较高，这在一定程度 限制 97mPa·S(50℃)，凝点 42℃。 了防蜡菌 的应用 。紫外诱变可用于增强微生物的抗 1．3 实验方法 高温能力或其他性能，已广泛应用于工业微生物的选 1．3．1 菌种诱变 育、获得高产菌株等。其过程为利用一定强度的紫外 取培养至对数生长期的原始 KB菌2OmL至无 线照射细菌体，使其基因发生不定向突变，再从若干突 菌培养皿中，20w 紫外灯照射 60S，用无菌生理盐 变体中筛选出需要的高效突变体。突变体可能会同时 水将诱变后菌液稀释到 10—6涂平板 ，60℃避光培 获得多种新性状，这需要实验检测来确定。 养 48h。挑选存活菌株 ，接种 LB培养基 60℃培 本文对现存 的防蜡菌种 KB进行紫外诱变 ，从 养 ，测定培养液吸光度和表面张力 。选取菌浓增加 、 中选出能抗高温 同时防蜡功效不会降低 的突变体， 表面张力降低的菌株为正向突变株，接种 固体斜面 并进行防蜡性能评价和防蜡机理分析 。 培养基保存 ，并检测各正向突变株 60℃下的微生物 防蜡率 。 1 实验材料与方法 1．3．2 微生物室 内防蜡率检测 1．1 地层条件 将 固体斜面保存 的防蜡菌 以LB培养基培养 ， 菌种筛选和评价主要针对泌阳凹陷南部陡坡带泌 将培养后菌液以泌304区块地层水稀释至 10 ，分 304区块，该区块结蜡严重的油层主要为 H2层，地层 别倒人已称重的金属筒 (容积 120mL)70mL，45℃ 温度 50~60℃，pH8~8．5，矿化度6000mg／L，析 摇床 150r／rain培养 24h。培养后倒 出菌液 10 蜡井段温度≤45℃，井 口温度20~32℃。