烯酯酰辅酶A水解酶1过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞株HcaP生物学行为的影响.pdfVIP

虫堡胜疽苤盍!Q!!生!旦箍箜鲞箍!翅g堕旦』Q!型：丛!Y!Q!!：!!!：箜：盟!：! ·337· ．基础研究． 烯酯酰辅酶A水解酶1过表达对小鼠 低淋巴道转移潜能肝癌细胞株Hca—P 生物学行为的影响 王梅宋波王波张军唐建武 【摘要】 目的探讨烯酯酰辅酶A水解酶1(Echl)过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞 株Hca．P体外增殖生长、迁移和侵袭能力的影响，及其Echl表达水平与肝癌淋巴道转移潜能的关系。 方法将pcDNA3．1(+)一Echl重组质粒和空载体pcDNA3．1(+)分别稳定转染Hca．P细胞，通过半 定量逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测目的基因及其蛋白表达水平；在获得过表达Echl 的P咖细胞株和实验对照组％载体细胞株后，采用CCK-8法检测细胞分裂增殖能力，TransweH迁移实 验和Transwell侵袭实验评估Echl过表达对Hca-P细胞迁移和侵袭能力的影响。结果P洲组和 mRNA相对表达水平分别为3．21±0．43和1．44±0．03，差异有统计学意义(P= P卒藏体组细胞中Eehl 0．029)。PEch。组、P空载体组和未经处理的Hca-P组(P组)细胞中Echl蛋白表达水平分别为0．140± 0．005、0．088士0．003和0．078±0．006，差异有统计学意义(P0．05)。PEch，组的细胞增殖能力明显 高于P空载体组和P组(P0．05)。Transwell迁移实验显示，P咄组、P空载体组和P组穿膜细胞数分别为 (143．00±7．25)个、(95．73±3．88)个和(106．67±3．54)个，PEch。组与P空载体组和P组比较，差异均有统计 学意义(均P0．05)。Transwen侵袭实验显示，PEdd组、P空载体组和P组穿膜细胞数分别为(77．20± 5．46)个、(46．34±4．35)个和(49．80±5．21)个，PEch。组与％载体组和P组比较，差异均有统计学意义 (均P0．05)。结论Echl过表达可以显著促进Hca．P细胞增殖，增强其迁移和侵袭能力。Eehl有 望成为临床基因治疗肝癌的靶点之一。 【主题词】肝肿瘤；烯酯酰辅酶A水解酶1；基因表达；细胞增殖；细胞迁移；细胞侵 袭；肿瘤转移 EffectEchl of on behaviorofmouse Hca-Pcells／nvitro overexpressionbiological hepatocarcinoma WANG Medical Mei，SONGBo，WANGBo，ZHANGJun，TANG胁n—Wit．DepartmentofPathology，Dalian University，Dalian116044，China author：TANG Corresponding Jian—WU，Email：jwtang_53@yahoo．c凡 【Abstract】 To theeffectof A the Objectiveinvestigate enoylcoenzymehydratase一1(Echl)on in andinvasionofmouse Hca—Pcellsvitro．MethodsRecombinant proliferation ability hepatocarcinoma and transfectedintoHca-Pcells cationic pcDNA3．1(+)-Eehlgene pcDNA3．1(+)were by liposomes introduction．Cloneof cellsthat Echlandcloneofcontrol werescreened PEchl stablyexpre