不同抗原修复方法对Ki-67蛋白检测结果的影响.pdfVIP

· 664 · 中华实用诊 断与治疗杂志 2011年 7月第 25卷第 7期 JournalofChinesePracticalDiagnosisandTherapy · 论 著 · 不 同抗原修复方法对 Ki一67蛋 白检测结果的影响 邹 金 ，李亨芬，邢咏梅 ，聂金梅 ，白如玉，刁 勇 (华侨大学分子药物学研究所 ，福建省泉州市 362021) [摘要] 目的：探讨不同抗原修复对 A549肿瘤组织 内Ki一67蛋 白检测结果的影 响。方法 ：采用酶修复法 、柠檬酸微 波修复法 、柠檬酸高压修复法、Tris／EDTA微波修复法、Tris／EDTA高压修复法等对肿瘤组织的石蜡切片进行修复，采 用二步法进行免疫组织化学染色。结果 ：肿瘤组织的核蛋 白Ki67经柠檬酸微波修复后 ，染色效果较其他修复方法明显 增强 ，且定位佳 ，对 比度清晰 。结论 ：在核蛋 白Ki一67免疫组织化学染色中，柠檬酸微波修复法优于其他抗原修复方法。 [关键词] 免疫组织化学；Ki一67；抗原修复 中图分类号 ：R361 ．2 文献标志码 ：A 文章编号 2011)07—0664—03 Effectofdifferentantigen retrievalmethodson Ki一67 immunohistochemical staining ZOU Jin，LIHeng—fen，XING Yong—mei，NIEJin—mei，BAIRu—yu，DIAO Yong InstituteofMolecularMedicine，HuaqiaoUniversity，Quanzhou362021，China -[Abstract]0bjectiveToexploretheeffectofdifferentmethodsofantigenretrievalontheresultof immunohistochemicalstaining of Ki一67． M ethods Antigens were retrieved respectively by using trypsin，citricmicrowave，citricautoclave，Tris／EDTA microwaveandTris／EDTA autoclavein tumorparaffin sectionsfrom nudemouse．followedbyimmunohistochemicalstaining．ResultsAfter antigen retrievalwith citricmicrowave，thepositive staining intensity ofnuclearprotein Ki一67was enhanced。andKi一67wasbetter1ocatedbyusingofthismethod than theothers．Conclusion In the immunohistochem icalstainingmethodsofKi一67，citricmicrowaveiSthebestonetoretrieveantigen． EKeywords]Immunohistochemistry；Ki一67；antigenretrieval Ki一67定位于细胞核 ，是反映细胞增殖活性的常 物技术开发有限公司。 用指标 。石蜡切片质量直接影响病理诊断的快速性和 1．2 方法 准确性 。在免疫组织化学过程 中，有较多因素影响染 1．2．1 制片 从 BALB／C裸 鼠皮下取出快速增长的 色效果及准确定位 ，其 中抗原修复是较重要一项。为 A549皮下移植瘤石蜡包埋后 ，对其进 行常规石蜡切 了解肿瘤组织中Ki一67的最佳修复方法 ，本研究采用 片 ，连续切片5张 ，每张 5x／m，依次进行展片、脱蜡 ，滴 不同方法对裸