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实例解析——质谱分析方法（MS） 一、 原理 分子在气态被电离 离子在高压电场中加速 在电场和磁场中偏转 到达收集器，产生信号 强度与到达的离子数目成正比 二、 实验仪器 真空系统——进样系统——离子源——质量分析器——检测器 真空系统（大气压化学源（APCI） 原因： 1．大量氧会烧坏离子源的灯丝（EI源）； 2．用作加速离子的几千伏高压会引起放电； 3．引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。 4、分子自由程升高，有空气下会和氮气、氧气碰撞，自由程过低 (2) 进样系统 直接进样法（静态发）：纯化合物，气体或挥发性液体 直接插入探针法：挥发性很小的固体-激光解离 动态平衡法（色谱进样）：复杂混合物，不影响真空度 离子源 电子轰击源（EI） 原理：高能电子轰击样品发生下述反应 范围：主要用于易挥发性有机样品的电离 特点：能量高，碎片多，分子离子峰较小 化学电离源(CI) 原理：引进一种反应气体，如甲烷、异丁烷、氨等。灯丝发出的电子首先将反应气电离，然后反应气离子与样品分子进行分子-离子反应，并使样品气电离。 特点：碎片少、可提供的结构信息少. 缺点：不适用于难挥发、热不稳定或极性较大的有机物 电喷雾电离源（ESI） 原理：在微滴蒸发过程中，表面电荷密度逐渐增大，当增大到某个临界值时，离子就可以从表面蒸发出来。 应用：液相色谱-质谱联用仪 范围：分析极性强（易吸电子）的大分子有机化合物，如蛋白质、肽、糖，容易带电 特点：既是接口装置, 又是电离装置。 大气压化学电离（APCI） 原理：喷嘴的下游放置一个针状放电电极，通过放电电极的高压放电，使空气中某些中性分子电电离，产生H3O+ ,N2+, O2+ O+等离子，溶剂分子也会电离，这些离子与分析物分子进行离子-分子反应，使分析物分子离子化（大气下的化学电离源） 范围：用来分析中等极性的化合物，所分析的化合物分子量一般小于1000Da..带电较困难，通过其他转移电给化合物 基质辅助激光解吸电离源（MALDI) 原理：被分析的样品置于涂有基质的样品靶上，激光照射到样品靶上，基质分子吸收并传递激光能量，与样品分子一起蒸发到气相，并使样品分子电离。 基质：须易于提供质子 范围：适合于生物大分子，如肽、蛋白质、核酸等。得到的质谱主要是分子离子，准分子离子 PS：非极性的一般用EI/CI，中极性APCI，高极性ESI 质量分析器 电磁式：已经淘汰 双聚焦质量分析器：质量相同，动能不同的离子经静电场后分离 特点：分辨高，质量范围中等，常用语无机材料和有机结构分析GC-MS 四极杆分析器：体积小，重量轻，质量范围小，定量分析但不是全谱 飞行时间分析器：TOF 结构简单，无需电场磁场，速度快，质量范围大300000（GC-MS,LC-MS）但分辨率低。 离子阱分析器：小型化，简单，灵敏度高（GC-MS） 检测器 1) 法拉第杯(Faraday)(加有一定电压的筒状或平板状金属电极） 2) 电子倍增器 3) 照相底板(主要用于火花源双聚焦) 三、 定量分析 采用四级杆质谱，可测定 相关知识： 方法评定标准： 分辨率：质谱分辨不同荷质比的能力 质量准确度：测量分子量和计算分子量的误差 分子离子峰： 定义 在电子轰击下,有机物分子电离一个电子形成的离子,叫分子离子 分子离子的质量就是化合物的相对分子量。 分子离子足够稳定，质谱中位于质荷比最高位置的峰就是分子离子峰。 特点 一定是质谱中最大的峰，在质谱最右端 氮规律 相邻峰质量差合理 改变条件可检验 同位素峰（M+1峰）： 组成有机化合物一些主要元素，如C H ,O, N,S,Cl ,Br等 都具有同位素 如37 Cl/35 Cl=32.4 81Br/79 Br=98.0 碎片离子峰： 碎片离子是分子离子碎裂产生的。碎片离子还可以进一步碎裂形成更小的离子 ABCD + e - ? ABCD+ + 2e - 分子离子 开裂规律：均裂、异裂、半异裂 开裂类型：单纯开裂、重排开裂、复杂开裂、双重重排 GC-MS 优点 GC：善于分离，不善于定性 MS：善于定性，不善于分离 GC-MS：分离，定性同时进行 GC ：填充柱 毛细管柱均可 MS ：常用四极杆质谱仪 近来还有离子阱和飞行时间质谱仪 : 须用分子分离器 毛细管柱: 数据系统：计算机 数据库 LC-MS LC ： 一般LC MS ： 常用四极杆质谱仪（同GC-MS） 离子阱质谱仪， 飞行时间质谱仪， 串联质谱 接口：大气压电离源，包括： 电喷雾源（ESI 大气压化学电离源 (APCI)