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检测人Ⅰ型干扰素生物学活性的新方法.pdf
第 卷 第 期 病 毒 学 报
18 1 Vol . 18 No . 1
年 月
2 0 0 2 3 CHI NESE JOURNAL OF VIROLOGY March 2 0 0 2
检测人 型干扰素生物学活性的新方法
!
!
赵军，段招军，王红艳 ，李武平，吕宏亮，魏开坤，孙立连，侯云德
（中国预防医学科学院病毒学研究所 病毒基因工程国家重点实验室，北京 100052 ）
摘要：为建立一种更简便、安全、有效的检测 型干扰素（ ）的方法，将可被 型 诱导的人 基因启动子
I IFN I IFN 6 - 16
与表达产物容易被检测的 半乳糖苷酶基因相连，构建成重组质粒，然后转染人羊膜传代细胞系，筛选阳性克隆，
-
B
最终建立了一种适用于检测 型IFN 的简便、快速、敏感、特异和重复性好的新型方法，其敏感性同标准的细胞病
I
变抑制法相同。
关键词： 型干扰素；干扰素刺激反应元件
I
中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
@78 A 1000 - 872 1 2002 0 1 - 0057 - 04
干扰素是一类重要的细胞因子，它们在同种细 和rhIL - 2 由本室提供。pSV2 - Neo 和 pSV - - galac-
GV B
tosidase 载体购自Prome a 公司。 306 .4 . 1 质粒由Andrew
胞上具有广谱的抗病毒、抗细胞分裂、免疫调节等多 g p
［，］ C . G . Porter 博士（帝国癌症研究基金实验室，英国）惠赠，该
种生物学活性 1 2 。随着干扰素的应用日益广泛，
质粒包括完整的人 6 - 16 基因（含完整的启动子序列）。
干扰素的临床和实验室检测也显得尤为重要。尽管
G4 18 和RP MI - 1640 培养基为 Gibco 公司产品。标准胎牛
［ ］
目前已有多种针对 IFN 的检测方法 3 - 5 。但综合 血清为H clone 公司产品。Pfu Ta 酶和PCR 回收试剂盒为
y g
起来考虑，尚未有任何一种新方法能够替代常规的 公司产品。两条引物：
Prome a P1 5 CGGAAT T CAAT A-
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