ELISA测定疫苗中庆大霉素含量的结果评价分析.pdfVIP

药 物 研 究 ELISA测定疫苗中庆大霉素含量的结果评价分析 刘少刚 吴洁 (汕头大学医学院 广东汕头 515041) 糕 0 O 1 1 【摘要l目的 用间接竞争ELISA试剂盒检测庆大霉素在乙脑减毒活疫苗中的含量并对观察捡侧的结果进行评价分析。方法 使用l0 倍稀释乙脑减毒活疲苗液配制庆大霉素标准液，以间接竞争EusA法检测疫苗在一定范围内的庆大霉素含量，并对该方法的线性、高中低浓度 的加样回收率、精密性等进行验证 ，并对抽选样品进行检测。结果 庆大霉素在高、中、低3种浓度乙脑减毒活疫苗1o倍稀释溶液中的 回收卒分别为90．00％．97．00％和1O1．8％，平均回收率为96．27％(RSD--2．3％)，有效检测范围为0．1～8ng／ntL(R--0．9974)。检测的样品含 量稳定(1~49的RSD=2．35％，5人份的RSD1．82％)。结论 表明ELISA方法可用于疫苗中庆大霉素含量的检测，适用性较好。 【关键词】ELISA 疫苗 含量 庆大霉素 【中图分类号】R927 【文献标识码lA 【文章编号 l1674一O742(2011)06(b)一O128—03 在现有疫苗的生产过程中常加入庆大霉素等抗生素。抗生素 活疫苗中庆大霉素的含量。通过 以庆大霉素标准品为对照物 ， 类药物对感染性疾病有重大的治疗作用，然而滥用抗生素会产生 测定了疫苗制品中残留抗生素的含量，以建立疫苗中抗生素含 无法挽回的不 良后果。中国和美国等国家都制定了生物制品中抗 量检测 的有效方法 ，通过控制疫苗 中抗生素的含量 ，来提高疫 生素的最大残留限量指标 ，以严格控制在生物制 品生产 中加入抗 苗使用 的安全性 。 生素的量…。 1 材料与样品 常用的检测疫苗中抗生素含量的方法有微生物学方法、理 1．1 试剂与仪器 化方法和免疫分析方法 2【】。而 间接竞争ELISA试剂盒测定法具 庆大霉素ELISA快速检测试剂盒(4L京望尔生物技术有限公 有操作时间短、特异性好、速度快、操作误差小等特点 3【】，以至于 司)。硫酸庆大霉素注射液(批天津药业焦作有限公 得到了广泛 的应用 。本文采用酶标试剂盒间接竞争ELISA法 ， 司)}酶标仪(Modei550，美国BIO-RAD)；冼板机 ；微量加样器；电热 并将乙型脑炎减毒活疫苗进行loR稀释来测定乙型脑炎减毒 恒温水浴锅 ；振荡器；庆大霉素标准品(批号200814，含量638U／mg， 表1 实验数据及测定结果 中国药品生物制 品检定所)。疫苗稳定剂 由广东省汕头市生物制 标准品溶液浓度(ng／mL) A 值的平均值 0．1 0．803 表2庆大霉素在乙型脑炎减毒活疫苗中的回收率 0．15 0．672 0．5 0．355 l 0．286 4 0．158 6