冰冻切片操作的体会.pdfVIP

2．比较韧的组织，如肌瘤等，容易产生横纹，可以通过加温来解决，只需要把大拇指贴在组织块面几 秒，最好戴手套，或者用玻片间的纸夹在指头与组织之间，或者将冰冻头置于室温环境几秒。 3．比较脆的组织，如甲状腺、肝、脾，淋巴结等不能冻得太硬，太硬容易产生破裂，所以注意冷冻的 程度，只要有4／5的组织已经冻住就可以了，等把冷冻头固定在机器上时，就刚好全部冻住，否则就会引 起组织发脆。也可以适当加温。 4．上皮和粘膜贴附的组织，如皮肤、胃肠等，应当使上皮面或者粘膜垂直于刀片，这样切更顺畅，能 更完整的切下上皮或者粘膜。以前，我切皮肤或者胃肠组织，不大注意方向，把上皮或者粘膜与刀片平行 放置，经常切下来的上皮或者粘膜就不完整，后来慢慢改进，现在切起来就好多了。 总之：在做冰冻切片时，结合实际情况操作，应对不同组织区别对待，认真仔细，多方分析，预 防和避免冰冻切片中常见问题的出现，才能提高冰冻制片质量，可更好发挥冰冻切片技术在病理诊断 中的作用。 改良抗酸染色 孔洁陈岗谢惠康 (上海市肺科医院，200433) 结核是一种危害大，范围广，在世界范围内都有较高发病率的一种传染性疾病。由于结核杆菌主 要通过空气传播，所以感染人数一直居高不下。WHO指出全世界已经感染分支杆菌的感染患者高达 300万人。 结核分为千酪型，增殖型和混合型三种，其中尤其因增殖型和混合型结核的病理形态在HE下不典型 容易与结节病，真菌等肉芽肿性疾病鉴别诊断上的困难。而抗酸在这类情况下就成为了结核鉴别诊断的一 种重要的手段。 首先介绍传统的抗酸方法： 1．常规二甲苯脱蜡两次，每次十五分钟。 2．Z．N氏石炭酸品红染液：不加温染色，放置时间稍长，30分钟；加温染色，至少加温30秒再放置 10分钟。染液的沉淀物易造成假阳性，需每周过滤一次。 3．水洗后，加l％的盐酸酒精分化至切片呈无色或淡粉红色。分化时间不得超过10分钟。 4．水洗后，加亚甲兰复染lO秒钟左右。复染时间不宜过长，否则会掩盖抗酸杆菌的颜色，造成假阴 性。 最后在油镜下观察：抗酸杆菌为鲜红色(无折光)。背景为淡蓝色。 虽然该操作是一种既传统又经典的染色法，但是由于结核杆菌的细胞壁含有大量脂质，多糖和蛋白质 复合物，因此不易着色，阳性率偏低，为了使抗酸阳性率得到进一步提高，我科通过实验，积累了一些经 验，对染色法进行了改良，阳性检出率有了很大的改善。 1．切片切片厚度增加至6-8微米，有利于提高结核杆菌的阳性检出率。 2．脱蜡 曾有报道用等量的汽油和松节油混合液代替传统的二甲苯脱蜡，经过我科实验证明用混合液 脱蜡阳性率有较大的提高，因为混合液保存菌体脂质不受破坏及菌体壁的完整性。 3．品红在特殊情况下如要寻找L型结核杆菌，在品红染液内加0．1毫升吐温。 194 冰冻切片操作的体会 作者： 黄一凡 作者单位： 川北医学院病理教研室 引用本文格式：黄一凡 冰冻切片操作的体会[会议论文] 2011