骨髓间充质干细胞作为种子细胞构建电纺组织工程血管.pdfVIP

第三届全国下肢血管疾病学术论坛 暨第四届全国血管外科与组织工程学术研讨会汇编 骨髓间充质干细胞作为种子细胞构建电纺组织工程血管 券拜焉 砖停母 量智惠 力隹畚 仃红夫 释大夼 王玉j分 摘要： 目的：以高分子材料聚乳酸一聚己内酯(PLCL)混合纤维蛋白原电纺构建组织工程血管支 架，通过铺植骨髓干细胞诱导的内皮样细胞构建具备良好远期通畅率的组织工程血管支架。 方法：以血管内皮生长因子(VEGF)定向诱导骨髓间充质干细胞分化为内皮样细胞，体 外扩增培养。对诱导后的细胞进行免疫荧光鉴定。以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂，PLCL溶解 其中得到浓度为8％的溶液。纤维蛋白原溶解于六氟异丙醇和10×DMEM混合溶液中得到 lOOmg／ml的溶液。把PLCL溶液与纤维蛋白原溶液按2：1体积进行混合，利用静电纺丝技术 构建组织工程支架。采用扫描电镜(SEM)检测支架的表面纤维形态，傅里叶全反射红外光谱 (ATR—FITR)进行支架表面基团分析，X射线光电子能谱(XPS)对表面元素组成进行表征， Via- 并检测了支架的力学性能。溶血试验、细胞毒性试验检测支架生物相容性。LlVE／DEAD bility／Cytotoxicitykit试剂盒检测支架对BMSC诱导的内皮样细胞的粘附、增殖的影响。 结果：24h后圆形细胞贴壁，72h细胞集落形成，呈纺锤形放射状生长；7天后内皮样细胞 证实混纺支架表面有纤维蛋白原氨基酸的存在。力学性能表明PLCL能够增加混纺支架的拉伸 强度及最大伸长率，改善了纤维蛋白原的力学性能。细胞毒性试验和溶血试验证明支架爱具备 良好的生物相容性。细胞粘附增殖实验表明，混纺支架具有良好的细胞增殖能力，共聚焦证实 在混纺支架表面，内皮样细胞生长良好，近乎铺满支架表面。 结论：PLCL与纤维蛋白原共混后行静电纺丝，能构建具有良好力学性能及生物活性的纳 米组织工程支架。骨髓干细胞经VEGF诱导后可在体外分化为内皮样细胞，与PLCL／纤维蛋白 原组织工程支架有良好的结合能力。 作者单位：200032上海1复旦大学附属中山医院血管外科 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目，编号2007AA032429 第三届全国下肢血管疾病学术论坛 暨第四届全国血管外科与组织工程学术研讨会汇编 关键词：电纺骨髓干细胞组织工程合成生物材料 Bone stemcellsasseedcellsforconstructed tissue vas。 mesenchymal electrospinningengineering cular nanofibrouswerefabricatedfrom Abstract blended scaffolds anelastomeric Electrospun synthetic biodegradable anatural solution)withdifferentvolumeratios．Bone stem protein(fibrinogen；100mg／ml mesenchymal anddifferentiated intovascularendothelium—likecellswith cells(BMSC)induced directionally vascularendothelialfactor(VEGF)Resultsshowthattheblendedscaffoldsconsistedof growth