基于电纺Hb-collagen复合物的新型生物传感器的研究.pdfVIP

基于电纺 Hb-collagen 复合物的新型生物传感器研究 郭峰，孙治政，章建兴，孟昭旭，郑卫* 哈尔滨工程大学生物医学材料科学与工程中心，黑龙江，哈尔滨，150001 Tel: 0451 Email: zhengwei75@126.com -1 -1 将I 型胶原大分子（10 mg·mL ) 和血红蛋白 (175 mg·mL ）分别溶于六氟 异丙醇（HTF ）中作为纺丝液。将清洗干净的GC 作为收集装置，固定于距离注 射器针头 12cm 处，在纺丝电压11kV，注射速率0.6mL·h-1 条件下将Hb-collagen 纳米纤维固定在 GC 电极表面，然后将制得的修饰电极用戊二醛交联5h 。修饰 电极在使用之前应在PBS 中浸泡2h 以上，以保证纳米纤维膜充分湿润。 纳米纤维的表面光滑无缺陷，且纤维呈带状，宽约2.3 µm ，厚约 450 nm （图 1）。当Hb-collagen 修饰电极在氮气饱和的0.10M PBS （pH=7 ）溶液中，扫描速 率200 mV·s-1 时，获得的循环伏安曲线在-0.35(vs. SCE)左右出现了一对明显的氧 化还原峰，非常接近于 Hb 中亚铁血红素辅基电活性中心Fe(III)/Fe(II)氧化还原 电对的电位。直接电子转移的速率常数ks=270.6 s-1 ，明显大于一些文献中报道的 值。这可能是由于collagen 具有良好的生物相容性，可以为蛋白质提供一个良好 的微环境。另外，Hb-collagen 电纺纳米纤的三维结构具有较大的比表面积和较 高的孔隙率，大大缩短了固定在电纺纳米界面上的Hb 内部活性基团和GC 之间 的距离，从而加快了它们之间的电子传递速率。 另外，当在溶液中加H O 后，在-0.40 V(vs. SCE)附近的还原峰电流明显增加， 2 2 同时伴随着氧化峰电流减小。图2为H O 的浓度与电流增加的关系。由图2可知， 2 2 当H O 的浓度在5-30 µmol·L-1范围内时，浓度与电流变化∆I呈线性关系。在信噪 2 2 比为3 时，可计算出H O 浓度的最低检测限为0.37 µmol·L-1 。同时，依据 2 2 Lineweaver-Burk方程可计算出Kmapp = 77.7 µM ，与其它纳米材料的米氏常数相比 较小，表明此生物传感器的灵敏度比较高。因此，这种电纺纳米纤维能够为纳米 电化学生物传感器的研究提供一定的基础。 0.20 0.15 14