土槿乙酸对小鼠变应性接触性皮炎的作用及其机制与研究.pdfVIP

第十一届全国中药和天然药物学术*)v／．-t垂- 中国沈阳2011．10 土槿乙酸对小鼠变应性接触性皮炎的作用及其机制研究 韦娜1，陈虹1，张予阳2，庾石山3 (1．天津武警后勤学院生药教研室天津300162，2．沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁 00050) 沈阳110016，3．中国医学科学院北京协和医学院药物研究所，北京1 目的：本文研究天然提取的中药单体土槿乙酸(PB)对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)模型的治 疗作用，并初步探讨其作用机制。方法：MTT法检测PB在体外对小鼠脏器细胞的毒性作用及对淋 模型小鼠作用后脾脏及耳组织中基因T-bet、GATA3、ROR-vt、Stat3、I】刚吖、IL-4、IL．10、TGF．D、 几_6、几．17、IL．17R 模型作用后耳组织磷酸化1-38MAPK(Thrl80ffyrl82)、磷酸化Stat3(Ser727)、磷酸化Akt(ser473) MAPK抑制剂对变应性接触性皮炎小鼠作用 及磷酸化NF柚p65(ser276)蛋白表达的影响。观察p-38 后耳肿胀度、耳肿胀重量差的影响。结果：MTT法检测发现PB在体外24h对小鼠胸腺细胞几乎无 和48h对脾淋巴细胞几乎无毒性，IC5010“mon，，72h ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖表现出抑制作用且有一定的时间和剂量依赖性，对混合淋巴细胞 反应中的T细胞增殖表现出抑制作用。不同浓度PB膏剂(0．1％、0．2％、0．4％)多次涂抹于模型小 鼠耳部，48h后能缓解炎症对体重增加的抑制，中高剂量组与模型组比有显著性差异(P0．05)；减 小耳肿胀度，24h与48h给药组与模型组比有显著性差异(Po．05)；降低耳肿胀重量、胸腺指数与 脾脏指数，中高剂量组与模型组比有显著性差异(Po．05)：耳组织切片HE染色显示模型组表皮的 棘层和基底层有明显的炎症细胞浸润，组织间隙水肿，而中高剂量组能明显减轻表面损伤，减轻水 肿，减少炎症细胞浸润；通过淋巴细胞转化实验证实中高剂量组能显著性抑制脾脏T淋巴细胞增殖 3、IL．17、IL-6、IL．17R 调模型组中升高的T．bet、IFN-y、ROR-vt、Star mRNA表达，上调模型组中 抑制模型中升高的相关蛋白磷酸化p-38 Stat 通过4次对ACD小鼠耳部涂抹P．38 (O．075％)、环孢素(1％)。结果显示在24h抑制剂组对小鼠耳肿胀度的抑制与模型组比有显著性差 结论：PB在体外能够表现出良好的免疫抑制活性，与阳性药地塞米松、环孢素、霉酚酸酯相比对正 常细胞表现更低的毒性，且在体内外都显示对T细胞具有一定的选择性抑制作用。土槿乙酸对小鼠 变应性接触性皮炎有良好的治疗效果，其机制可能与以下途径有关：l、调节体内Thl／Th2平衡：下 调T-bet、蜊吖基因表达，同时协同上调GATA3、IL_4基因表达。2、在体内产生免疫调节作用： 上调细胞因子IL-10、TGF．p基因和蛋白的表达。3、下调体内信号通路蛋白和细胞因子表达：下调 ROR-vt、Stat 3、 MAPK、NF柏三条信号通路和上调Akt信号通路协同作用。因此，土槿乙酸是一个具有自主知识 产权，新型抗炎及免疫调节的中药单体，具有良好的开发前景。