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REAL-TIME 引物设计与是否跨内含子的检测方法 感谢隔壁的山西人提出这个问题，以及丁香园，google ，百度，PUBMED 提供解决问题的 方法和线索供我拼凑整理。 问题一：如何在pubmed 上找到目标基因的 DNA 序列以及其内含子 和外显子情况。 步骤： 打开 NCBI 主页面，选 GENE，输入基因名称-》显示出很多不同种但名字相同的基因（fig.1 ） -》找到你要的种属，打开-》显示基因信息，找到”Genomic regions, transcripts, and products”, 点击基因名称，links 到 geneback （fig.2 ）-》显示了该基因 DNA 的信息(fig.3),可以看到这是 基因组 DNA,从 mRNA 选项中可以看到 JION 后面的是外显子的位置，该基因一个共有 3 个 内含子，4 个外显子，以及外显子的起至位置，为了以后的操作，可以把这个 DNA 序列和 外显子的起至位置记下来。 Fig.1 Fig.2