不同提纯方法对鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体效价影响的研究.pdfVIP

磷 可|南寓牲兽盈藿 2011年(第32卷)第8期 不同提 纯方 法对鸡 传染性 法氏囊 高免卵黄抗体效价影响 的研 究 陈鹏举 [1I，向忠菊 (1．安徽省瑞森生物科技有限责任公司，安徽 合肥 261100； 2．合肥市兽药制剂工程研究 中心) ‘ 摘 要 ：为提高鸡传染性法 氏囊卵黄抗体防治鸡传染性法 氏囊病的效果 ，比较不 同提纯方法对鸡传染性法 氏囊高免卵黄抗体效价的影响。通过直接离心法、酸化水提取法、氯仿提取法、聚 乙二醇法四种方法分别提取高 免蛋高免卵黄抗体并测定其提取前后抗体效价。试验结果表明，自制卵黄抗体效价为 1：64：直接离心法的抗体效 价为 1：128。酸化水提取法的抗体效价为 1：16，氯仿提取法抗体效价为 1：256，聚 乙二醇法的抗体效价是 1：32。试 验结果显示．使用氯仿提取法后检测的抗体效价最高．可用于生产鸡传染性法 氏囊高免 卵黄抗体 关键词 ：法 氏囊 ：高免卵黄：抗体提取：效价检测 中图分类号 ：$852．4 文献标识码 ：B 文章编号：1004~-5090(2011)08—0007—03 鸡传染性法氏囊炎(IBD)是危害我 国养禽业 的重要传 1．1．1 仪器’、设备 染病 …。禽类 IBD是由传染性法氏囊病毒引起的雏鸡的一 -离心机 、超净工作台、电热恒温培养 、天平等。 种急性、高度接触性传染病 ，尤其以4～6周龄雏鸡最易感 。 1．1．2 疫苗 它主要侵害鸡的体液免疫中枢器官法 氏囊 ，使鸡法氏囊 的 IBD二价弱毒细胞苗、IBD油乳剂灭活苗。 淋巴细胞生产受到破坏，不能产生免疫球蛋白，从而导致 1．1．3 试 试液 免疫能力降低 2[]。除此之外 ，它还容易伴发或继发其他疾 IBD标准琼扩抗原，购 自中国兽药监察所 ：盐酸溶液 、 病 ，导致大批鸡只发病死亡 ，给养鸡业造成重大经济损失 。 PBS缓冲液、PEG6000、0．9％生理盐水、琼脂粉 、氯仿。 长期 以来 ，IBD的防治主要依赖于疫苗和抗生素 ．然而 ，抗 1．1．4 高免蛋制备用鸡 生素的大量应用会在动物体 内导致药物残留和产生抗药 郑州市金水区某蛋鸡场．选用鸡只为产蛋正常且健壮 性 ，用疫苗免疫又常常达不到理想效果 ，因此群发病后卵 的母鸡 ，短期 内均未经任何免疫 ，经 HI和 AGP检测 IBDV 黄抗体 I 成为首选治疗药物。 为阴性。 卵黄抗体是指从免疫禽蛋 中提取出的针对特定抗原 1．2 方法 t 的抗体 ．也称卵黄免疫球蛋 白。特定病原菌的蛋黄抗体能 1．2．1 高免蛋的制备 黏附于病原菌的细胞壁上，直接抑制病原菌的生长；卵黄 1．2．1．1 基础免瘴 抗体还可黏附于细菌的菌毛上 ．使之不能黏附于肠道黏膜 用 IBDV弱毒疫苗对开产前或已开产 蛋鸡按说明书 上皮细胞 ；卵黄抗体在肠遣消化酶作用下 。降解为可结合 用量饮水免疫 ，7～10天后 。重复免疫 1次。 片段 ．进入血液后能与特定的病原菌黏附因子结合 ，使 1．2．1．2 强化免疫 病原菌不能黏附易感细胞而失去致病性 它还可以中和 用 IBDV油乳剂笑活疫苗胸部皮下注射2ml 相应的病毒或毒素 ．终止病原对机体的危害 。缓解症状 ． 1．2．1．3 高免蛋收集 恢复健康 。 强化免疫后第7天开始 ，每隔 3天抽样测定高免鸡蛋 卵黄抗体制备的 IgY在人类和动物疾病 的防治 中具 黄 中IBDV抗体效价 ，琼扩抗体效价 ≥1：64时收集