黄芪多糖对粒细胞减少大鼠并发侵袭性肺曲霉病的影响.pdfVIP

江西中医药 2012年 3月第 3期总43卷第 351期 黄芪多糖对粒细胞减少大鼠并发侵袭性肺曲霉病的影 响 ★ 任金贤。 庄海峰 高新芳 陈晓燕 吴艳芳 杨飞 沈建平 (1．浙江 中医药大学 2009级硕 士研究生 杭州 310053；2．浙江中医药大学第一附属医院 浙江省中医院 杭州 310053) 摘要：目的：探讨黄芪多糖对粒细胞减少大鼠并发侵袭性肺 曲霉病的作用。方法：建立粒细胞减少期并发侵袭性肺 曲霉病大 鼠模型，腹腔注射黄芪多糖或(和)两性霉素B，对比评价黄芪多糖对粒细胞减少大鼠并发侵袭性肺 曲霉病的作用。结果：黄 芪多糖注射组胸腺指数明显高于模型组和两性霉素B组 (P0．05)，黄芪多糖注射组胸腺细胞凋亡指数明显低于模型组 (P 0．05)，黄芪多糖联合两性霉素B注射组半乳甘露聚糖值明显低于模型组 (P0．05)。结论：黄芪多糖联合两性霉素B治疗 粒细胞减少大鼠并发侵袭性肺曲霉病有减轻疾病程度作用。 关键词：黄芪多糖；侵袭性肺曲霉病；半乳甘露聚糖 中图分类号：R285．5 文献标识码：B 侵袭性肺 曲霉病 (Invasivepulmonaryaspergillo． 新药研究开发有限责任公司；烟 曲霉菌株，编号 sis，IPA)起病隐匿，预后差，患者的病死率达 56． (CCCCMIDA1)，购 自南京中国真菌菌种保藏中心； 0％ 一88．1％ … ， 慢性病患者免疫力极度低下时致 水合氯醛，分析纯，纯度 99．5％，国药集团化学试 病 ，免疫功能正常者少见，宿主反应、病理特征和感 剂有限公司。 染程度主要取决于宿主，而不仅是 曲霉菌的毒力或 1．3 粒细胞减少大鼠模型 环磷酰胺药量为75 致病性 ，所以，在严重免疫缺陷的患者 (如接受骨 mg／kg(接种前5天注射 1次)、60mg／kg(之后每隔 髓抑制化疗和免疫调节治疗的恶性血液病患者、长 4天注射 1次)，所有实验动物于烟曲霉菌悬液接种 期接受糖皮质激素治疗的患者)及某些特殊病房 前5天腹腔注射环磷酰胺 75mg／kg，之后每隔4天 (如骨髓移植病房)病人中其发病率很高。为找到 注射 1次相同剂量，直至处死。实验过程中大鼠眼 预防和治疗本病的新手段，本实验复制粒细胞减少 眶采血，手工计数白细胞数。 期并发IPA大 鼠模型，应用黄芪多糖 (AstragalusPo— 1．4 烟曲霉孢子悬液的制备和接种 烟曲霉菌株 lysacharin，APS)或 (和)两性霉素 B(Amphotericin 转种于斜面培养基上，35~C培养 5天形成大量烟曲 B，AmB)治疗，探讨 APS对本病模型大鼠的影响， 霉菌孢子，分生孢子收集于含有0．1％吐温8O的磷 现报道如下。 酸盐缓冲液中，制成烟 曲霉菌分生孢子菌液，通过 8 1 材料与方法 层无菌粗纱过滤去除菌丝，将过滤后的孢子悬液用 1．1 实验动物 清洁级7周龄雄性 SD大鼠40只， 含有0．1％吐温 8O的PBS清洗 2次，在光学显微镜 委托浙江中医药大学动物实验中心购买及饲养)， 下用血细胞计数板计数，调整孢子悬液浓度为 1× 体重 180—220g，随机分为 5组，每组 8只。(1)对 10cfu／L，4~C1个月之内储存备用，使用前震荡均 照组 (正常喂养及生理盐水造模)，(2)模型组(造模 匀。紫外线灭菌手术室内，10％水合氯醛溶液麻醉 后正常喂养)，(3)APS组 (造模后腹腔注射APS)， 动物 (剂量 3mL／kg)，麻醉后固定大鼠于固定板上， (4)AmB组 (造模后腹腔注射 Arab)，(5)APS+ 颈前气管外备皮及消毒后暴露大鼠气管，气管内注 AmB组 (造模后腹腔注射APS+AmB)。给药量根 射烟曲霉菌孢子悬液0．3mL，注射后消毒缝合创 口。 据人与动物剂量换算表计算。 1．5 组织病理学检查 接种后第4天处死动物，取 1．2 主要药物和试剂 环磷酰胺注射液