基于2-DE和蛋白质组技术筛选的日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶的表达及其诊断应用.pdfVIP

中国人兽共患病学报 484 ChineseJournalofZoonoses 2011，27 (6) 文章编号：1002—2694(2011)06—0484—05 基于 2-DE和蛋 白质组技术筛选的日本血吸虫鸟 氨酸氨基转移酶的表达及其诊断应用* 胡梅梅 ，钟政荣。，罗庆礼 ，方婷娜 ，沈继龙 摘 要：目的 扩增并表达 日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶(sjOAT)，评价其在 日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方 法 构建 pET28a／SjOAT质粒 ，转化至E．coliBL21，IPTG诱导表达 ；应用 Ni。1。亲和层析法纯化 OAT；SDS和 West— ernblot分析、鉴定表达产物；应用ELISA法检测待检患者血清，比较 SjOAT与 日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对血吸虫 和其它寄生虫感染的检测结果。结果 成功克隆表达了SjOAT，Westernblot检测结果表 明rSjOAT能被血吸虫病患者血 清识别；以rSjOAT—ELISA和 SEA—EIISA分别检测急／慢性血吸虫病患者和其它寄生虫感染者血清的结果经校正Y检 验 ，差