HPLC法测定咽扁宁冲剂梓醇肉桂酸绿原酸含量.doc

HPLC法测定咽扁宁冲剂梓醇、肉桂酸、绿原酸含量 主要仪器及试剂 高效液相色谱仪等度系统（赛智，LC-10T），配紫外 超声波清洗机 分析天平 柱温箱 甲醇：色谱纯 乙腈：色谱纯 冰乙酸：分析纯 对照品：梓醇、肉桂酸、绿原酸，单标。 实验室用水为二次蒸馏水。 实验部分 梓醇测定 色谱条件 色谱柱：C18色谱柱，250 mm ×4.6 mm, 5μm 流动相：水：甲醇：乙腈=95:4:1（V：V：V） 流速 ：1.0ml/min 检测波长：212nm 柱温：35℃ 进样量：20ul 混合对照品的制备 精密称取梓醇对照品4.2mg，置于25ml量瓶中，加水溶解至刻度制成浓度为0.168mg/ml的对照品储备溶液，备用。 样品溶液的制备 将样品置于研钵中研制成粉末状，精密称取0.5g左右样品于25ml容量瓶，加甲醇至刻度线，超声处理30min，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液水浴蒸干，残渣用少量水溶解并转移至中性氧化铝柱上（5g 中性氧化铝，湿法装柱，内径 1.5cm，分别用水、甲醇各 20mL 预洗），静置 30min，用甲醇 20mL 洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣用水溶解，转移至 10mL 量瓶中，加水至刻度，摇匀，用 0.45μm 微孔膜过滤，即得供试品溶液。 肉桂酸的测定 色谱条件 色谱柱：C18色谱柱，250 mm ×4.6 mm, 5μm 流动相：甲醇：1%冰乙酸溶液=50:50（V:V） 流速 ：1.2ml/min 柱温 ：35℃ 检测波长：278nm 进样量：20ul 对照品溶液的制备 精密称取肉桂酸对照品12.71mg，置于25ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度制成浓度为0.52mg/ml的对照品储备溶液，备用。 样品溶液的制备 称取研细的本品 0.5g，精密称定，置于 25mL 量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理 30min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，用 0.45μm 微孔膜过滤，即得供试品溶液。。 绿原酸的测定 色谱条件 色谱柱：C18色谱柱，250 mm ×4.6 mm, 5μm 流动相：甲醇：3%冰乙酸溶液=15:85（V:V） 流速 ：1.0ml/min 柱温 ：35℃ 检测波长：327nm 进样量：20ul 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品4.43mg，置于25ml量瓶中，加水溶解至刻度制成浓度为0.1772mg/ml的对照品储备溶液，备用。 样品溶液的制备 称取研细的本品 0.5g，精密称定，置于 25mL 量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理 30min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，用 0.45μm 微孔膜过滤，即得供试品溶液。。