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【 j山竹子根乙醇提取物的体外抗HBV作用 尺227 空军广州医院肝病研究所 (5]0602) 陈文吟 郑业华 I 嘶关键词善山兰竹子根乙肝病毒细胞培养 ，7高．薯哇茹、荔南1彳受聋0至 山竹子为山竹子科植物岭南山竹子 行采样和检测共次一。 新I斟 田 山竹 子 为 科 植 物 岭 南 山竹 子 行 样 共 4次。。 Garciniaoblougfiifol~aChamp，主要 分布在我 国 12．2 药物的细胞毒性实验Lj：2．2．15细胞 南方地区。该植物的根具有清热解毒、消毒止 按 l×l 个／ml接种于 96孔板上，培养 4天 痛的功效 在广东省连山地区曾用于慢性乙型 后更换含有 不同药物 (Am—Amp与山竹子 根 肝炎的治疗 。我院传染科 自 1992年 以来 ，对 95％乙醇提取物)浓度的培养液，继续培养 4 包括 山竹子根在 内的由几味 中草药组方的 “肝 小时后吸尽培养液 ，更换含有 1rr mlMTr的 毒清”复方进行临床验证 ，发现其治疗慢性乙 培养液 ，37℃培养 4小 时后 ，弃上清每孔加 型肝炎有鼓。为了进一步研究其作用机理，我 100 DMSO，测定 570m 和 650nnl的OD值 ， 们采用先进 的提取分离方法 ，选用 2．2．15细 求算出药物的最大无毒浓度 。 胞拣 ，分别对各昧草药的水提取物、95％乙醇 1．2．3 药 物 对 2．2．15细 胞 表 达 SmAg、 提取物等提取组分进行体外抗 HBV筛选，井 HB~Ag的影响：根据药物毒性实验结果 ，造择 得到一些有意义的结果uJ。近期在筛选 中发现 合适的最大浓度，倍 比稀释成 3个浓度 ；细胞 山竹子根 95％乙醇提取物对 22．15细胞株分 按 1×l05个 ／ml接种于 24孔板，每孔 tml，4 泌 HBV有一定影响，现报道如下。 天后，换上含有不同浓度药物的培养液 ，每个 1 材料与方法 浓度设 3个平行孔，4天后收集上清液待检， 1．1 材料 2．2．15细胞株 ：由解放军 302医 并求出不同浓度药物对 HSsAg、}玎 的抑l制 院病 毒学研究室提供 。细 胞培养 液：DMEM 率。实验按 同样方法重复 3次 。 (Gibco公 司)，胎牛血清 (杭州四季青生化厂) 2 结果 G418(Gibeo公司)，四甲基偶氨唑蓝 (瑞士 Flu1． 2．1 2．2．15细胞 分泌 HBsAf、HB~Ag规律 cu公司)。HBsA~、ttBeAs检澳 『( )药盘 ：中 结果表 明，2．2．15细 胞培养 4天后井 始分泌 山生物工程公司提供。药物l ：nj竹子根 95％乙 Ⅲ岫 、HB~Ag，8—12天基本达到高峰水平 ， 醇提取物漫膏由广州市医药工业研究所提供， 16天仍保持高水平表达 (表 1)。 屠培养液酉己制成相当于原药材干重的一定浓重 2．2 细胞毒 性 实验 结果表 明，山竹子根 ( ／m1)。Ava—Amp由l广东省药物研究所药厂 95％乙醇提取物的最大无毒浓度为 780gg／,nl； 提供，用培养液配制成一定浓度 ( ／m1)。 Am—Amp的最大无毒浓度为 500t,g／m~。 1．2 方 法 23 药物对 HBs妇、t-mcAg袁这的影响 结 1．2．1 2．2．15细胞分泌 rIB~g、HBe妇 的规 果表 明，山竹子根 95％乙醇提取物 在 195— 律 ：2．2．15细 胞按 l×l 个 ／ml接种于 24孔 780 ml浓度 范 围 内、Am—Alnp在 62．5— 板 ，每孔 fml，每 4天换 1次培养液并收集上 250tc