SOD活性和同工酶检测系统中干扰因素的研究.pdf

维普资讯 淅江大学学禳(农业与生命科学版)28(2)：l79～】82，2oo2 JournalofZhejiangUniversity (Agric．＆LifeSci．) 文章编号 ：10O8—9209(2002)020l79～04 SOD活性和同工酶检测系统中干扰因素的研究 胡家恕，邵爱萍 ，任爱霞 (浙江大学 生物化学研究所 ，浙江 杭州 310029 摘 要 {采用NBT光化还原反应捡洲 SOD活性时，反应系统 中蛋 白质音量在 100 以上将对SOD活 性刹定造成严重干杌 ，井且干扰程度随蛋 白质含量的增加而加剧 ；连革三酚 由氧化 系统受难生紊 c 的 干托 ，当反应系统 中维生紊c的音量在 20 g以上，则明显押制连革三醉 的 自氧化．同一植物材料 的 OS D同工酶在不同戚度 的凝胶系统 中分离将显示出不同的分离效果 美 键 词 }超氧物岐化酶 ；氟兰四唑 ；连革三酚 ；检洲 中图分类号 {Q554 文献标识码 ：A HU Jia—shu，SHAOAiping·RENAi—xia([nst．ofBiochern·ZhefiangUniversity，Hangzhou310029 China) Research on interference factors of assays ofSOD activity and isoenzyme．JournalofZhejiang University (Agric．＆LifoSci．)，2002．28(2)179 182 Abstract Theassaysofsuperoxidedismutase(SOD)activitybyphotoreductionofNBTwasinterfered whentheproteincontentofthereactionsystem wasmorethani00 g—andtheseverityofinterference increasedwithincreaseinamountofproteinpresent；Theauto—oxidationofpyrogal[olwasalsoinhibit— edwhenthevitaminC contentofthereactionsystem reachedover20 g-ElectrDphoresjsindicatedthat differentOS D activebandsvgereobtainedfTOm thecrudeextractsofthesameplanton polyaerylamide gels0fdif rentconcentration． Keywords：superoxidedismutase fOS D)；nitrobluetetrazolium (NBT)；pyrogatlal‘assay 超氧物歧化酶 (EC．1．15．1．1superoxide 关 ，故正在 日益引起人们 的重视． dismutase．简称 s0D)广泛存在于各种生物体 自从 MeCord和 Fridovich等首先发现 内，它能催 化超氧 阴离子 自由基 (Oz’)发生歧 sOD以来 ，人们 已建立起 了一整套 ·速而有效 化反应，所产生的过氧化氢在机体 内易被过氧 的分离及分析方法．常见的SOD测定方法有化 化氢酶分解成HO和 ()。．从而解除0 对细胞 学法 ，免疫法和等电聚焦法三种，以化学法应用 的毒害作用．因SOD作为 自由基清除剂与机体 最为普遍．目前测定s0D活性的方法包括 比色 的抗衰老，抗肿瘤 ，辐射防护及植物抗逆性等有 法和化学发光法 ，均基于 同一原理：根据 s0D 抑制体系中O 。自由基的