HPLCELSD测定柴胡总皂苷中柴胡皂苷ad的含量.pdf

·430· V01．17No．5 中国中医药科技2010年9月第17卷第5期Sep．2010 ·专题报道· HPLC—ELSD测定柴胡总皂苷 日水 中柴胡皂苷a、d的含里 浦锦宝△ 梁卫青郑军献胡轶娟魏克民 (浙江省中医药研究院·杭州310007) 摘要 目的：应用高效液相色谱一蒸发光散射(HPLC—EL5D)检测柴胡总皂苷中柴胡皂苷axd的含 量。方法：柴胡以碱性乙醇进行提取，AB一8大孔吸附树脂分离纯化，得到柴胡总皂苷，用HPLC—ELSD 法测定柴胡皂苷a,d的含量。结果：柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、d的含量分别为4．31％，12．86％，柴胡皂 简便，结果可靠，可作为柴胡提取物质量控制的检测方法。 主题词柴胡总皂苷／分析柴胡皂苷a柴胡皂苷d 柴胡是我国传统中药中重要和常用的药材，研究发现柴 胡具有解表和里、疏肝解郁、升举阳气、保肝护肝等多方面的 提取液，过滤，去除残渣。过滤液回收乙醇至无乙醇味，得到 生理活性¨]，其中柴胡皂苷是柴胡中主要的有效成分，具有 柴胡皂苷粗提液，备用。 一定的开发前景。要充分实现柴胡的药用价值，提高含柴胡 2．1．2分离纯化取AB一8大孔吸附树脂，用筛网去杂 制剂的质量，选用合理的提取工艺非常重要。2005年版《中质，装柱后，用乙醇浸泡过夜，继续用乙醇冲洗至无白色浑浊 国药典》【23柴胡项下尚未规定含量测定。近几年来很多新 止，再用去离子水、4％的HCI溶液、去离子水、2％的YaOH 技术【3一】、新方法用于柴胡皂苷的提取分离和测定。本文研 溶液、去离子水依次冲洗，最后至水洗液呈中性。分次取柴 究了从柴胡中经提取分离得到的柴胡总皂苷中柴胡皂苷a、 胡皂苷粗提液上AB一8大孔吸附树脂，进行吸附。柴胡皂 d的含量分析方法，为进一步研究柴胡皂苷类成分的药理作 苷粗提液上树脂后放置2小时，用去离子水10BV以1BV／h 用奠定了基础。 的流速进行清洗，弃去清洗液，再用20％乙醇IOBV以lBV／ 1实验材料 h的流速进行清洗，再弃去清洗液，最后用70％乙醇10BV 1．1仪器Varian prostar高效液相色谱仪(230三元泵，410以2BV／h的流速进行洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓 6．0工作站)， 自动进样器，380一LC蒸发光散射检测器，star 缩液真空干燥，粉碎，得到柴胡皂苷提取物。 GM一0．33II津腾隔膜真空泵：天津市津腾实验设备有限公 2．2柴胡皂苷a,d的含量测定 司；YXJ一2型高速离心机：常州金坛电讯电器厂；数控恒温2．2．1 色谱条件 浴锅：上海申胜生物技术有限公司；KQ3200DB型数控超声 波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；SartoriusBP211D电子 柱温为室温；蒸发温度100℃；N2流速1．2lVmin。 天平：北京赛多利斯天平有限公司。 2．2．2对照品溶液制备取柴胡皂苷a4．50mg，柴胡皂苷 1．2药品和试剂柴胡皂苷a对照品(批号：11cr777— d8．00rag，精密称定，分别置lOml容量瓶中，加甲醇超声完 200404)、柴胡皂苷d对照品(批号：110778—200404)：均购 全溶解后，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。分别精 自中国生物制品药品检定所；柴胡皂苷粗提物：由本实验室 密吸取上述储备液1．0ml。置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至