借助ITS序列用GFP标记巴西橡胶树棒孢霉落叶病病原菌.pdfVIP

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2015-09-04 发布于浙江
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热带作物学报2015，36(3)：575—580 Chinese of Journal TropicalCrops 借助ITS序列用GFP标记巴西橡胶树棒孢霉落叶病病原茵刘晓妹1，张贺2 张欣2 谢艺贤2 韦运谢，，曹申文-，蒲金基z} 1热带作物种质资源保护与洋用坶u ·囊带磊森磊淼毵-与发利t／t燕矗蠡氧萎海南海口570228：rI-发利用教育部重点实验室坶吲博。 101 二农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室2裹里靠翥菩箨霭掌謦譬耢囊髫鬈缝薹霎蠢墨海南海口571 3中国热带农业科学院热带生物技术研究所．海南海口 571101 摘要 c∞s泌。如)侵染引起的巴西橡胶树棒孢霉落叶病是影响橡胶树产胶量的主要由多主棒孢菌(Corynespora 病害之一。为了开展该病原菌在活体叶片中的病理学研究，本实验将绿色荧光蛋白加基因表达盒插入了多主棒孢菌经定点突变后的ITS序列中，构建了重组质粒plTGH，并经PEG介导转化了原生质体．获得了GFP标记的多主棒孢菌转化子，所获得的转化子经过连续7次转接培养后仍能在分生孢子、分生孢子梗、芽管和菌丝中稳定地发出强烈的绿色荧光，其生长特性和致病性与野生菌株无明显差异。关键词巴西橡胶树；多主棒孢菌；绿色荧光蛋白；ITS定点突变：标记中图分类号s432．4 文献标识码A GFPas in aMarker cassiicolafrom Corynespora HeveabrasiliensisITS UsingSequence LIU Yixian2 Xiaomeil，ZHANGHe2，ZHANGXin2，XIE WEI Yunxie3，CAOShenwenl，PU Jinji2+ EnvironmentandPlant Protectionand 1 Protection,Hainan co啦萨of University／KeyLaboratoryof Development Utilization 570228,China ofTropicalCropGermplasmResources，MinistryofEducation，Haikou,Hainan 2EnvironmentandPlantProtection Pest Institute，CATAS／KeyLaboratoryofIntegratedManagement on 571101，China TropicalCrops，MinistryofAgriculture，Haikou,Hainan 3Institute Bioscience TA S,Hai