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海洋尾丝虫_Uronemamarinum_的DNA微量提取研究.pdf
47() :6 ~ 8, 2001
A cta Zoologica Sinica
( Uronema marinum) DNA
*
陈子桂 容 丽 宋微波
( , 266003)
, ( Uronema marinum) ,
DNA /
/ DNA
DNA
Ampicillin 20 ml , 02 m
, , - 20
123 10 mmol Tris-HCl, pH 83;
( 50 mmol KCl; 25 mmol MgCl2; 06% Tween 20;
, 2000; , 1999) 06% Nonidet P40; 60 g/ml Proteinase K02 m
, : , - 20 (Kusch et al .,
DNA 1996)
, 13
DNA
, 3 10 l
(40 mg/ml), 1, 2
( Uronema mar inum ) , 30 l ,
DNA , , 22 2~ 3
14
141
1
10 ml , 2 500 r/ min 3~ 5
11 min, , 1 ml,
,
20~ 30 m 10~ 15 m 142 (
( ) , 141) 10 ml ,3 000~ 3 500 r/min
( 3~ 5 min, , 05 ml, 2 15 ml Eppendorf ,
12 3 000~ 3 500 r/min 3~ 5 ,
121 NaCl 26518, MgCl2 2~ 3
2447, MgSO 3305, CaCl 1141, KCl 50 l, 450 l
4 2
0725, NaHCO 0202, NaBr 0083 , - 20 C01C02
3
143 (
122 Ampicillin ( 40 mg/ml) 08 g 141) 5%,
* (No
, , 25 , : E-mail: protozoa mail.ouqd.eda.cn
:( Uronema marinum )DNA 7
15 min3 000~ 3 500 r/min 3~ 5 62 , 72 5
min, , 15 ml Eppendorf 16S-like-F: 5-AAC CTG GTT GAT
3~ 5 min, 142 CCT GCCAGT-3, 16S-like-R: 5-TGA TCC TTC
C03 C04 TGC AGG TTC ACC TAC-3 ( E
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