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粗壮女贞RAPD_PCR实验体系优化的研究.pdf
25 2 贵 州 科 学 V o l. 25, N o. 2
2007 6 GU IZH OU SC IENCE Jun. 2007
RAPD - PCR
1 2 1 1 2 1
鄢东海 , 郑道君 , 梁远发 , 令狐昌弟 , 刘国民, 田永辉
( 1. , 564100 2. , 570228 )
以粗壮女贞嫩芽为材料, 对粗壮女贞 RA PD 分 中一些重要影响因素, 包括模板 DNA 浓度dNT Ps 浓
2 +
度M g 浓度T aq 酶用量退火温度延伸时间以及循环次数等因子进行了比较系统的摸索和优化. 建立了适
2 +
合粗壮女贞 RA P - PCRD 分 的优化反应体系: 即 25l反应体系中M g 浓度为 2. 5mM, dNT Ps 浓度为 200M,
T aq 酶用量为 2. 0U, 引物浓度为 10pmo l, 模板浓度为 80ng. PCR 扩增程序为: 94 预变性 4m in, 然后按 94 变
性 30 s, 37 退火 45 s, 72 延伸 120 s, 进行 4 0 个循环, 最后于 72 延伸 10m in. 以该优化的RA PD 条件进行重复
实验, 其实验结果重现性良好.
: 苦丁茶 粗壮女贞 RAPD 反应体系
S571. 1 A 1003- 6563( 2007) 02 - 0056- 09
STUDY ON THE OPT IM IZA T ION OF RAPD - PCR EXPER IMEN
TAL SY STEM IN LIG USTR UM ROB USTUM ( ROXB) BL
1 2 1 1 2 1
YAN D ong - hai, ZHENG D ao - jun , LIANG Yuan- f a , LIN GH U Chang - di, LIU Guo - min , TIAN Yong - hui
( 1. T he T ea R esearch Institute of G u izhou P rov ince, Gu izhou, M e itan 564 100 2. T he ku dingch a R esea rch In stitute
o f H a inan U niversity, H a inan, H aikou 570228 )
AB STRACT U sing the young buds as the test m a teria,l several mi po rtant facto
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