氨基酸红外吸收光谱的测定实验报告.docVIP

氨基酸红外吸收光谱的测定 一、实验目的 熟悉固体样品压片技术。 掌握红外光谱测试方法与仪器使用规程。 练习红外光谱解析方法。 二、实验要点 选择固体样品测定其红外光谱，然后进行光谱解析。 三．仪器试剂 AVATAR360 FT-IR型红外光谱仪(美国Nicolet公司)，压片机，玛瑙研钵，光谱纯KBr， 丙氨酸，苯丙氨酸；苏氨酸，缬氨酸；丝氨酸，半胱氨酸。 四．实验原理 (一)　红外光谱法对试样的要求 红外光谱的试样可以是液体、固体或气体，一般应要求： 1、试样应该是单一组份的纯物质，纯度应98%或符合商业规格，才便于与纯物质的标准光谱进行对照。多组份试样应在测定前尽量预先用分馏、萃取、重结晶或色谱法进行分离提纯，否则各组份光谱相互重叠，难于判断。 2、试样中不应含有游离水。水本身有红外吸收，会严重干扰样品谱，而且会侵蚀吸收池的盐窗。 3、试样的浓度和测试厚度应选择适当，以使光谱图中的大多数吸收峰的透射比处于10%~80%范围内。 (二)　制样的方法：固体试样压片法 将1~2mg试样与200mg纯KBr研细均匀，置于模具中，在油压机上压成透明薄片，即可用于测定。试样和KBr都应经干燥处理，研磨到粒度小于2微米，以免散射光影响。 五．实验步骤 1．开机：开启电脑，运行OMNIC操作软件。检查电脑与主机的通信。 2．固体样品测试 取干燥样品1~2mg与200mg光谱纯KBr放入玛瑙研钵中，混匀研细，取适量放入压片模具中，将模具置于压片机中，30MPa压30 sec。减压、退模。即得一透明片子，将其放在样品框中测试。IR扫描后得到图谱。 六．谱图解析 氨基酸对比解谱练习，根据理论课教材找出各峰归属。 对照分组： ①丙氨酸，苯丙氨酸；②苏氨酸，缬氨酸；③丝氨酸，半胱氨酸。 L-苏氨酸图谱: 由该图可知，在1700cm-1处有窄，强吸收峰，说明有C=O存在，在2500-3300处有比较宽的吸收峰，在3000cm-1处有宽，中强度吸收，900cm-1处也有弱吸收，说明有-OH存在，，则该化合物含有羧基-COOH，而且在1000-1300区域内有C-O的强吸收峰,3350cm-1和3180cm-1处分别有吸收，说明存在-NH2，在1460 cm-1和1380 cm-1处有吸收，说明存在-CH3，由此可以断定该吸收谱图为苏氨酸的红外吸收谱图。 2．L-缬氨酸图谱 由该图可知，在1700cm-1处有窄，强吸收峰，说明有C=O存在，在2500-3300处有比较宽的吸收峰，在3000cm-1处有宽，中强度吸收，900cm-1处也有弱吸收，说明有-OH存在，，则该化合物含有羧基-COOH，而且在1000-1300区域内有C-O的强吸收峰,3350cm-1和3180cm-1处分别有吸收，说明存在-NH2，在1460 cm-1和1380 cm-1处有吸收，说明存在-CH3，在1340 cm-1处有吸收，说明存在-CH，由此可以确定该谱图为缬氨酸的红外吸收谱图。 七．思考题 1.实验中为什么要用KBr作为载体？ 如果想绘制原料的光谱图，就必须找到一种载体作为溶剂，与样品按1:200的比例混合在一起压成一个透红外的小薄片，在红外光谱仪上绘制出一张合格的样品光谱图，这就必须要求这个载体在整个红外波段内本身绝对不能有任何其他吸收峰，并具有很高的透过率，所以真正的光谱纯溴化钾晶体就能满足这个条件，在整个红外波段是一条完全的直线光谱，无任何吸收峰这样才能得到一张真正的属于样品的吸收光谱。