小鼠骨髓抑制和再生过程中SodGpxCat抗氧化酶基因的动态表达研究.pdfVIP

ChinMed 103 中国医药生物技术2008年4月第3卷第2期 2008，Vol，3，No．2 Biotechnol，April ·论著· 小鼠骨髓抑制和再生过程中Sod／Gpx／Cat 抗氧化酶基因的动态表达研究 毛文伟，路慧丽，刘芳，张晶，王方圆，杜丽娟， 张忠辉，向砥，赵梅，吴明媛，王群，韩伟 【摘要】 CAT仅发现1种亚型【3制。研究表明，SOD／GPX／ 目的研究Sod／Gpx／Cat抗氧化酶系列基因在小鼠骨髓抑CAT抗氧化酶不同亚型的表达组合与不同的细胞 制和再生过程中的动态表达，了解氧化应激在骨髓再生过程 类型生理过程(如细胞增殖、分化和迁移)有关17J。 中的作用。 骨髓是成熟机体内细胞增殖和分化最为旺盛的器 官，通过对小鼠骨髓抑制和再生过程中Sod／Gpx／ 方法 制备经5．氟尿嘧啶(5．Fu)注射后的骨髓抑制和再 Cat抗氧化酶系统基因动态表达的研究，了解氧化 生C57BL帕小鼠模型，分别在5．Fu注射前(第0天)和 应激在骨髓再生过程中的作用，为研发有效对抗化 注射后第3、7、11、14天各断颈处死6只小鼠(分别记 为0d组、3d组、7d组、11d组、14d组)，收集小鼠疗所致骨髓抑制副作用的生物技术新药提供线索。 骨髓单核细胞。Trizol试剂抽提小鼠骨髓单核细胞总RNA， 430A芯片检测小鼠 1材料与方法 采用Affymetrix小鼠全基因组cDNA 1．1主要材料和仪器 骨髓细胞Sod／Gpx／Cat系列基因的表达，并对检测结果进 行半定量RT-PCR鉴定。 1，1．1主要试剂和仪器5一氟尿嘧啶(5．Fu)购自 结果 上海旭东海普药业有限公司；反转录酶(ReverTra SodllSod21GpxllGpx3b／Gpx4b／Cat在各组小鼠骨髓 DNA聚合 d组开始表达， Ace．0【．1M)为日本东洋纺公司产品；Taq 细胞中均有较高的表达，Sod3／Gpx2则在7 酶为上海鼎国生物技术有限公司产品；Trizol试剂 11d组和14d组表达量持续减少。其中Sod2／Gpx3b／ 为上海英俊生物技术有限公司产品；小鼠cDNA d组到14d组均为表达量先增加后减少； Gpx4b／Cat从0 430A芯片购自上海晶泰生物技术有限公司；Sod／ Sodl／Gpxl则为表达量先减少后增加；在各组小鼠骨髓细胞 Gpx／Cat系列基因引物合成由上海英俊生物技术有 中未检测到Gpx3a／Gpx4a／Gpx5／Gpx6的表达。 限公司完成。IVC系统购自苏州冯氏实验动物设备 结论 Sod／Gpx／Cat抗氧化酶系列基因在小鼠骨髓抑制和 有限公司；UV-2000型分光光度计为尤尼柯(上海) 再生过程中呈现特征性的动态变化，这种变化提示了骨髓细