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土茯苓对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学及相关因子ET、NO、TGF-β1的影响.pdf
·320· 2010VoL17No.4
中国中医药科技2010年7月第17卷第4期July
土茯苓对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学及
相关因子ET、NO、TGF—13l的影响宰
王德军 寿旗扬 陈方明 周卫民周大兴朱科燕谢日青
(浙江中医药大学·杭州310053)
摘要 目的:观察土茯苓对DN大鼠肾组织形态学及相关因子的影响。方法:用尾静脉注射STZ致大
鼠DN模型,按GLU值分层随机分成模型组,土茯苓高、中、低旁l量组和阳性对照组,另取同批次7只大鼠
为正常对照组;各组经口灌胃给予相应药物,每日1次,连续4周。放免法测定血NO、ET含量;取肾测定
肾脏指数,进行肾脏常规病理观察和TGF一8。(免疫细化法)在肾小球内表达的检测。结果:土茯苓可显
母。的表达;HE染色和PAS染色结果显示,高、中剂量组大鼠部分肾小球内系膜细胞增生,少量肾小管上
皮空泡化。个别形成上皮管型,PAS染色弱阳性,部分基底膜增生,低剂量组部分肾小球体积增大,系膜细
胞增生,部分肾小管上皮细胞空泡化,部分形成上皮管型,肾小球基底膜增生明显。结论:土茯苓能够一
定程度的改善DN模型大鼠肾脏病理变化,抑制肾脏TGF—B,表达和舒张血管是其部分作用机制。
主题词糖尿病肾病/中医药疗法土茯苓/治疗应用 糖尿病肾病/病理学 大鼠
糖尿病肾病(Diabeticnephropathy,DN)是糖尿病(DM)B。):SantaCruz;二抗(兔两步法试剂盒)i由北京中杉金桥生
代谢异常引起的肾小球硬化症,也是DM常见的微血管并发 物技术有限公司进口分装。
症之一,是引起糖尿病患者死亡的主要病因之一。目前对 1.3主要仪器显微镜,(Nikoneclipse80i,CCD:DS—Ffl
DN尚缺乏有效的治疗手段,因此积极寻找有效治疗DN的500万像素):日本Nikon公司;IraasingSystems:CarlZeiss公
药物对于提高患者的生存质量、延长寿命,具有重要意义。 司;SN一682B放射免疫1测量仪:中科院上海原子能研究所
土茯苓是百合科植物光叶菝葜(SmilaxglabraRoxb.)的 日环仪器一厂。
干燥根茎。大量实验证实土茯苓具有B一受体阻滞样作用, 1.4动物模型制备及分组给药将69只大鼠禁食15小时
而有报道认为,13一受体阻滞剂在减少糖尿病微循环和大血 后,尾静脉一次性注射50mg·ks~STZ,8周后,禁食不禁水
管合并症方面的功效与ACEI相同¨。1;也有实验证实,土lO小时,取血,测血糖(GLU)。1周后进行代谢试验,测定
茯苓可用于治疗肾小球硬化性肾病等HJ,因此其可能对DN24小时尿量,并取24小时尿,测定尿蛋白(u一什);禁食不
具有治疗和改善作用,临床上也有将土茯苓作为治疗DN的
主药,但它对防治DN的确切效果和机制未见研究报道。为
此本研究利用DN动物模型,探讨土茯苓对DN大鼠肾组织准。筛选50只成模大鼠(其余剔除)按GLU值分层随机分
形态学及相关因子的影响,为土茯苓防治DN的临床应用提 成5组,分别为模型对照组、土茯苓高剂量组、中剂量组、低
供实验和理论依据。 剂量组和阳性对照组,每组各10只,另取7只同批次的正常
1材料与方法 大鼠设为正常对照组。高、中、低剂量组经口灌胃土茯苓水
1.1 实验动物SD大鼠,清洁级,雄性,体重180—2009,由
中国科学院上海实验动物中一L,/上海斯莱克实验动物有限公 托普利5rag·ks~,正常和模型对照组灌胃生理盐水lml·
司提供,动物生产许可证:SCXK(沪)2007—0005。1009~,每日1次,连续4周。
1.2药品和试剂土茯苓:购自浙江中医药大学附属第二 1.5观察指标及测定末次给药后,禁食不禁水10小时,
门诊部,经浙江中医药大学植物资源室鉴定为土茯苓;卡托 眼眶取血放免法测定一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的含量;
普利片(ACEI剂):中美上海施贵宝制药有限公司,批号:取。肾测定肾脏指数,HE和PAS染色进行肾脏病理学观察
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