中药化学实验指导—实验九__防己中粉防己碱的提取分离与检识.docVIP

实验九 防己中粉防己碱的提取分离与检识 （一）目的要求 学习生物碱类成分的一般提取分离法，通过实验要求： 1．掌握生物碱的溶剂提取法和粉防己碱与防己诺林碱的分离方法。 2．熟悉生物碱的一般理化性质。 3．熟悉粉防己碱和防己诺林碱的检识方法。 4．掌握连续回流法（索氏提取器）、萃取法、结晶法等的基本操作过程及注意事项。 （二）主要化学成分的结构及性质 防己为防己科植物粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根。总生物碱含量约为1.5％～2.3％，主要为粉防己碱和防己诺林碱。 1．粉防己碱(tetrandrine) 又称粉防己甲素，分子式C38H42N2O6，在防己中的含量约为1％，为无色针状结晶（乙醚），mp.217～218℃。易溶于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿，溶于乙醚、苯等有机溶剂，几乎不溶于水和石油醚。 粉防己碱 R=CH3 防己诺林碱 R=H 2．防己诺林碱(fangchinoline) 又称粉防己乙素，分子式C37H40N2O6，在防己中的含量约为0.5％，六面体粒状结晶（丙酮），mp.237～238℃。溶解度与粉防己碱相似，但因较粉防己碱多一个酚羟基，故极性较粉防己碱稍大，因此在冷苯中的溶解度小于粉防己碱，可利用此性质相互分离。 （三）实验原理 本实验是根据粉防己碱和防己诺林碱游离时难溶于水，易溶于氯仿，成盐后易溶于水，难溶于氯仿的性质提取得到总生物碱。再利用两者在冷苯中的溶解度不同，使之相互分离。 （四）实验内容 1．防己总生物碱的提取 略 2．防己总生物碱的精制 略 3．粉防己碱和防己诺林碱的分离 略 4．防己生物碱的检识 （1）生物碱沉淀反应 取粉防己碱的盐酸水溶液8 ml分置于4支试管中，分别滴加下列试剂2～3滴，观察并记录有无沉淀产生及颜色变化。 ①碘化铋钾试剂 ②碘化汞钾试剂 ③碘－碘化钾试剂 ④硅钨酸试剂 （2）薄层色谱检识 薄层板：硅胶G-CMC-Na板 试 样：自制粉防己碱乙醇溶液 自制防己诺林碱乙醇溶液 对照品：粉防己碱标准品乙醇溶液 防己诺林碱标准品乙醇溶液 展开剂：氯仿-丙酮-甲醇（6∶1∶1）氨气饱和 显色剂：喷雾改良碘化铋钾试剂 （五）实验说明及注意事项 1．提取总生物碱时，回收乙醇至稀浸膏状即可，不宜过干，否则当加入1％盐酸水溶液后，易结成胶状团块，影响提取效果。 2．两相溶剂萃取时，应注意不可用力振摇，应将分液漏斗轻轻旋转摇动，以免产生乳化现象，影响分层，但萃取振摇的时间需适当延长。且不可因怕产生乳化现象而不敢振摇或为预防乳化现象产生而减少振摇的程度和时间，从而造成萃取分离不完全。要力求萃取完全，提尽生物碱，防止生物碱丢失过多而影响收得率。倘若发生严重乳化现象难以分层时，可用以下方法解决：将难以分层的乳化液置于三角烧瓶中，取定性滤纸少许揉成蓬松的团块，放入乳化液中，用玻璃棒搅拌片刻后，乳化液中的粘稠物质被吸附在滤纸团的周围，从而削弱和破坏了乳化液的稳定性，克服了乳化现象，因而得到澄清溶液。然后滤过，必要时可再加入适量溶剂洗涤滤纸团，滤过，合并滤液即可。 3．检查生物碱是否萃取完全的方法，通常采用薄层色谱、纸上斑点试验或生物碱沉淀反应。取最后一次氯仿萃取液数滴，水浴上蒸去溶剂，残留物加5％盐酸溶液0.5ml溶解后，傾入试管中，加碘化铋钾试剂1～2滴，如无沉淀或无明显混浊，则表示生物碱已提取完全或基本被提取完全，否则应继续萃取。也可取最后一次氯仿萃取液1滴，滴于一薄层板或滤纸片上，干燥后，喷洒改良碘化铋钾试剂，观察有无红棕色斑点出现，若无红棕色斑点，表示已萃取完全。 （六）思考题 1．粉防己碱、防己诺林碱在结构与性质上有何异同点？实验过程中，应怎样利用它们的共性及个性进行提取及分离？请设计方案。 2．分离水溶性与脂溶性生物碱的常用方法有哪些？ 3．萃取过程中怎样防止和消除乳化？